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- fermentas
- ER1571
- 2025年09月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Hpy8I (MjaIV) (10 U/µL)
- 规格：
200 units
描述
| 5' | G | T | N ↓ | N | A | C | 3' | ||||
| 3' | C | A | N ↑ | N | T | G | 5' |
Thermo Scientific Hpy8I (MjaIV) restriction enzyme recognizes GTN^NAC sites and cuts best at 37°C in Tango buffer. See Reaction Conditions for Restriction Enzymes for a table of enzyme activity, conditions for double digestion, and heat inactivation for this and other restriction enzymes. Note: Also available as a FastDigest enzyme for rapid DNA digestion. Isoschizomers: Hpy166II.
Thermo Scientific conventional restriction endonucleases are a large collection of high quality restriction enzymes, optimized to work in one of the buffers of the Five Buffer System. In addition, the universal Tango buffer is provided for convenience in double digestions. All of the enzymes exhibit 100% activity in the recommended buffer and reaction conditions. To ensure consistent performance, Thermo Scientific restriction enzyme reaction buffers contain premixed BSA, which enhances the stability of many enzymes and binds contaminants that may be present in DNA preparations.
Features
• Superior quality—stringent quality control and industry leading manufacturing process
• Convenient color-coded Five Buffer System
• Includes universal Tango buffer for double-digestions
• BSA premixed in reaction buffers
• Wide selection of restriction endonuclease specificities
Applications
规格
| Compatible Buffer: | 10x Buffer Tango |
|---|---|
| Enzyme: | Hpy8I (MjaIV) |
| Methylation Sensitivity: | CpG methylation-sensitive, Not dam methylation-sensitive, Not dcm methylation-sensitive |
| Optimal Reaction Temperature: | 37° C |
| Product Size: | 200 units |
| Sensitive to Heat Inactivation: | Yes |
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文献和实验mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 500 µg/ml BSA和50%甘油(pH 7.4 @ 25℃)。 稀释液C： 250 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.15% Triton X-100, 200 µg/ml BSA和50%甘油(pH 7.4 @ 25℃)。 * 表示稀释时需要添加MgCl2 至终浓度10 mM可用稀释缓冲液A进行稀释的酶:Aat II Acc
长时间反应时内切酶的活性保持情况因酶而异。本表中列出了在16小时内完全酶解底物DNA所需的最小酶量。 实验方法：在50µl的反应体系中，分别加入1µg的单位定义底物DNA和1.00、0.50、0.25和0.13个单位的内切酶，37℃（或要求的最适温度）反应16小时。用琼脂糖凝胶电泳法来确定在16小时内酶解1µg底物DNA所需的最小酶量。 16小时酶解1µg底物需要酶量小于1单位的酶可以用加入较少的酶量和延长反应时间的方法节省酶的用量。实际16小时酶解1µg底物的内切酶最小用量视
热失活是终止酶切反应的一种简便易行的方法。大多数最适反应温度是37℃的酶在65℃下温育20分钟即可失活。一些在65℃下不能失活的酶如将温度升高至80℃，温育20分钟也可失活。下表注明了每种酶的失活条件。 在50μl的反应体系中，37℃条件下，以0.5μg小牛胸腺DNA作为底物，加入5-10μl内切酶及相应缓冲液，反应60分钟，然后升温至65℃或80℃温育20分钟进行热失活。在上述混合液中加入0.5μg底物DNA（通常为λDNA），调节温度至最适反应温度，温育60分钟。若琼脂糖电泳显示底物
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