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- NEB
- E6270
- 2026年03月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | E6270 | NEBNext®DNA 快速文库制备试剂盒-Ion Torrent™ | NEBNext®Fast DNA Library Prep Set for Ion Torrent™ |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| E6270L | NEBNext DNA 快速文库制备试剂盒（Ion Torrent） | NEBNext® Fast DNA Library Prep Set for Ion Torrent™ | 50 rxns |
产品特点
NEBNext® DNA 快速文库制备试剂盒-Ion Torrent® 支持从已打断的 DNA 进行精简、高效的文库制备。
- 高产量
- 实验流程快速、操作简单：不超过 2 小时，最大限度减少手动操作时间
- 样本起始量范围广（10 ng – 1 μg）
如果酶法打断 DNA，则可使用包含酶法片段化试剂的试剂盒。
NEBNext DNA 快速文库制备试剂盒-Ion Torrent 适用于起始 DNA 机械方式片段化（例如 Covaris® 超声打断）的情况。此试剂盒的组分和操作流程经过优化，适用于经机械方法打断的不同 DNA 体积及浓度，可用于检测 10 ng - 1µg 的起始量，工作流程时长不超过 2 小时，实际操作时间约为 12 分钟。
DNA 文库制备工作流程（Ion Torrent）
使用 NEBNext-Ion Torrent 试剂盒建库的代表性结果
批次质控
所提供的单独批次均通过额外功能验证。单个试剂通过标准酶活性和质控分析，并同时满足各单独组分页面列出的严格的附加质控标准- 产品类别:
- Ion Torrent 文库制备产品
- 应用:
- DNA Sequencing
备注：以上仅为 E6270 的部分产品信息，如需NEB货号 E6270 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶，反应10分钟。平滑末端连接：在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时，或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外，NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1：在25°C条件下，用1 unit（1:400稀释后取1 µl）T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
的DNA，70°C温育5分钟，冰上冷却后，再加入20个单位的T4多聚核苷酸激酶，37°C温育30分钟。 怎样才能提高PCR产物平滑末端的连接效率? 载体应该去磷酸化以降低自身环化，插入片段的5"末端应具有磷酸基。其它提高连接效率的方法还有：降低ATP在连接反应缓冲液中的浓度，增加插入片段与载体的比例或使用快速连接试剂盒(NEB #M2200)。另外，可使用平端克隆试剂盒(NEB #E0103)。 VentR或Deep VentR DNA聚合酶产生平滑末端，可是我要
分子生物学技术和应用操作之后，最常见的有：PCR；限制性酶切消化；寡核苷酸合成，以及下一代测序（NGS）的片段化、末端修饰和连接步骤。 可从凝胶中纯化 PCR 产物和 限制酶消化的 DNA 用于下游应用，例如末端修饰，连接，克隆和测序。 在寡核苷酸合成之后，聚丙烯酰胺凝胶电泳是从盐和截短序列中分离和纯化全长寡核苷酸的主要方法之一。 对于 Illumina 和 Ion Torrent NGS 平台，作为测序文库制备的一部分，样品片段化，末端修饰并连接到衔接子上。在这些步骤之后，以称为大小选择的方法
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