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- NEB
- E6285
- 2026年03月02日
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- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | E6285 | NEBNext®DNA 快速片段化 & 文库制备试剂盒-Ion Torrent™ | NEBNext®Fast DNA Fragmentation & Library Prep Set for Ion Torrent™ |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| E6285L | NEBNext DNA 快速片段化 & 文库制备试剂盒（Ion Torrent） | NEBNext® Fast DNA Fragmentation and Library Prep Set for Ion Torrent™ | 50 rxns |
产品特点
The NEBNext® Fast DNA Fragmentation & Library Prep Set for Ion Torrent® includes enzymatic DNA fragmentation in a streamlined, high-performance library prep workflow.
- High yield
- Fast, simple workflow – under 2 hours, with minimal hands-on time
- Compatible with broad range of sample input (10 ng –1 μg)
NEBNext® DNA 快速片段化 & 文库制备试剂盒-Ion Torrent® 包含适用于酶促 DNA 片段化的试剂的预混液，并结合了末端修复。在进行接头连接和高保真文库扩增前，可最大限度减少样品损失，高效、可控地完成 DNA 剪切和末端平齐化。该试剂盒适用于 10 ng - 1µg 的起始量，工作流程时长不超过 2 小时，实际操作时间约为 12 分钟。
试剂盒中提供用于单重文库的接头和引物。要制备多样本文库，可使用 Thermo Fisher Scientific 的 Ion Xpress™ 检索序列接头。如果机械剪切 DNA，则可使用不包含酶促片段化试剂的试剂盒。
DNA 文库制备工作流程（Ion Torrent）
使用 NEBNext-Ion Torrent 试剂盒建库的代表性结果
使用 NEBNext DNA 快速片段化 & 文库制备试剂盒-Ion Torrent，将 0.5 µg GC 含量不同的 3 个基因组 DNA 用于构建 200 bp 和 400 bp 文库，并经由安捷伦生物分析仪（Agilent® Bioanalyzer®）分析。
代表性 Ion Torrent 运行报告
图 1：使用 Bioanalyzer® 2100（安捷伦科技有限公司）分析的片段化末端经修复的 DNA 的相对大小分布。
图 2：使用 AMPure XP 磁珠片段筛选的最终文库大小分布。
图 3：使用 E-Gel 片段筛选的最终文库大小分布。
批次质控
所提供的单独批次均通过额外功能验证。单个试剂通过标准酶活性和质控分析，并同时满足各单独组分页面列出的严格的附加质控标准- 产品类别:
- Ion Torrent 文库制备产品
- 应用:
- DNA Sequencing
备注：以上仅为 E6285 的部分产品信息，如需NEB货号 E6285 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验分子生物学技术和应用操作之后，最常见的有：PCR；限制性酶切消化；寡核苷酸合成，以及下一代测序（NGS）的片段化、末端修饰和连接步骤。 可从凝胶中纯化 PCR 产物和 限制酶消化的 DNA 用于下游应用，例如末端修饰，连接，克隆和测序。 在寡核苷酸合成之后，聚丙烯酰胺凝胶电泳是从盐和截短序列中分离和纯化全长寡核苷酸的主要方法之一。 对于 Illumina 和 Ion Torrent NGS 平台，作为测序文库制备的一部分，样品片段化，末端修饰并连接到衔接子上。在这些步骤之后，以称为大小选择的方法
Raf 蛋白 Ras 结合结构域的简并进化库合成以及利用片段互补法快速筛选二氢叶酸还原酶的快速折叠且稳定的克隆
重组的新方法 [ 12〜18] 。 如果没有适当的筛选策略，即使文库设计得再精巧也无法得到有用的产物。例如，在一个文库中筛选编码具有特定酶活、稳定性或结合靶标蛋白能力的蛋白质的理想方法是，在某细胞或有机体中表达该文库，而库中具有所需性质的成员可以在特定的条件或基因背景下，在特定的选择培养基中生长[1，19〜22 ]。但是，这种例子是极为 少见的，所以从事蛋白质工程研究的人员一直在寻求可以更为普遍应用的文库筛选方法 [ 23〜26 ]。更具体地说，结合检测经常可以用于在一个 DNA 文库中
（金色）或 CLIP-tag（紫色）与目标蛋白融合表达后，与标记物 X 发生自我标记，附属产物是鸟嘌呤或胞嘧啶。 特点： ● 方便 - 单次克隆表达后，可标记不同底物 ● 快速 - 标记方法简便 ● 特异性高 - 无需纯化，背景低 ● 准确 - 标记反应是在生理条件下形成特定位点的共价键 ● 无毒 - 底物对活细胞无毒性 ● 直接共价键标记 - 不需抗体和反复清洗 ● 选择范围广 - 大量不同且已为不同成像仪优化的底物可供选择
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