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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | E1610 | EpiMark®N6-甲基腺嘌呤富集试剂盒 | EpiMark®N6-Methyladenosine Enrichment Kit |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| E1610S | EpiMark® N6-甲基腺嘌呤富集试剂盒 | EpiMark N6-Methyladenosine Enrichment Kit | 20 reactions |
产品特点
The Epimark® N6-Methyladenosine Enrichment Kit can be used to enrich m6A modified RNA in immunoprecipitation protocols for downstream analysis by next-generation RNA sequencing or RT-qPCR.
- Complete protocol for enrichment of m6A-modified –RNA and analysis by RT- qPCR included
- RNA controls (m6A modified and unmodified RNA) enable monitoring of enrichment and depletion
- Antibody supplied in a ready-to-use solution form
EpiMark N6-甲基腺嘌呤富集试剂盒含有 N6-甲基腺嘌呤(m6A)兔源单克隆抗体。该试剂盒包含两种对照 RNA:一种有 m6A 修饰(Gaussia 荧光素酶),一种没有 m6A 修饰(Cypridina 荧光素酶),用于监测富集和去除程度。GLuc RNA 对照在转录过程中掺入了 20% 的 m6ATP 和 80% 的 ATP。
该试剂盒可用于在免疫沉淀实验流程中富集经 m6A 修饰的 RNA,可用于 RNA 测序或 RT-qPCR 等下游分析。在片段化 RNA 样本中,经修饰的 RNA 可与 N6-甲基腺嘌呤抗体结合,从而被与抗体结合的 Protein G 磁珠富集。经过多轮洗涤和纯化步骤后,富集的 RNA 洗脱于无核酸酶水中,可用于进一步分析。
当起始量最多为 250 µg 去除核糖体的 RNA 或富集的 Poly A+ RNA 时,每个试剂盒包含的试剂足以进行 10 x 2 轮免疫沉淀。当起始量最多为 250 µg 总 RNA 时,试剂盒包含的试剂足以进行 5 x 2 轮免疫沉淀。
- 产品类别:
- 富集,
- Epitranscriptome Analysis,
- 甲基化研究产品,
- DNA 甲基化分析,
- RNA 修饰, 二代测序文库制备产品
备注:以上仅为 E1610 的部分产品信息,如需NEB货号 E1610 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验E.coli 有几种机制可以辨别并破坏外源DNA。但这也成为克隆实验的重要问题,因为其导致了所要序列的回收量大大减少。这一问题可以使用通过突变关掉这些机制的菌株来避免。一个限制作用完全缺失的菌株需要缺失hsd、mcrA、mcrBC和mrr位点(见后)。 特异性: 由hsdRMS 基因编码的EcoKI限制会攻击在合适的酶切点(AAC[N6A]GTGC或GCAC[N6A]GTT)上未受 腺嘌呤甲基化保护的DNA(1)。由mcrA
是目前公认的研究此相互作用的最佳选择,是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的核心技术之一。它的基本原理是在活细胞状态下,固定蛋白质-DNA(染色质)复合物,并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法(抗体亲和)沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的 DNA 片段,通过对目的片段的纯化与后期检测,从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。ChIP 不仅可以检测体内多种转录因子与 DNA 的动态作用,还可用来研究组蛋白的各种共价修饰(如磷酸化、乙酰化、甲基化、泛素化等)与不同状态
-4 10-4 E.coli B 10-4 1 10-4 E.coli C 1 1 1 说明 K 和 B 菌株中存在一种限制系统,可排除外来的 DNA 。 10-4 的存活率是由宿主修饰系统作用的结果,此时限制系统还未起作用。而在 C 菌株不能限制来自 K 和 B 菌株的 DNA 。限制作用实际就是限制酶降解外源 DNA ,维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用,可使腺嘌呤 A 成为 N6 甲基-腺膘呤,胞嘧啶 C 成为 5' 甲基胞嘧啶。通过甲基
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