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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 英文名:
Plant DNA Pull-down Kit
- 保质期:
1年
- 供应商:
广州纽万生物科技有限公司
- 保存条件:
-20摄氏度保存
- 规格:
12T
01 产品介绍
DNA pull-down技术是研究DNA与蛋白质相互作用的核心方法,已成为当前研究热点。该技术利用特定目的DNA序列作为诱饵,捕获并鉴定与之结合的蛋白质。本试剂盒是以目的DNA片段合成生物素标记的特异性DNA为探针,该探针通过链霉亲和素(Streptavidin)与生物素(Biotin)之间高亲和力、高特异性的相互作用,牢固地结合在预先偶联了链霉亲和素的磁珠表面。将此DNA探针-磁珠复合物与含有目标蛋白的提取液共同孵育,使目的DNA与其特异性结合蛋白相互作用。孵育后,通过洗涤步骤去除未结合或非特异性结合的游离蛋白,保留磁珠-链霉亲和素-生物素化DNA探针-靶蛋白复合物。最后,将特异性结合的靶蛋白复合物洗脱,即可获得与目的DNA探针结合的蛋白质产物。洗脱得到的蛋白产物可进一步通过Western blot分析或质谱(MS)鉴定,以确定结合蛋白的种类和特性。
02 产品组分
|
名称 |
12 Tests规格 |
24 Tests规格 |
储存条件 |
|
Streptavidin Magnetic Beads |
500 μL |
1 mL |
4℃,1年 |
|
Lysis Buffer |
7 mL |
14 mL |
4℃,1年 |
|
NT2 Buffer |
16 mL |
32 mL |
4℃,1年 |
|
Wash Buffer |
32 mL |
64 mL |
4℃,1年 |
|
Elution Buffer |
650 μL |
1.3 mL |
4℃,1年 |
|
*Protease inhibitor |
230 μL |
460 μL |
-20℃,1年 |
02 试剂盒操作流程

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文献和实验qiubiaodsg 我最近在做pull down 实验,先用western blot 标记的是被拉的蛋白,结果片子上是一片白板,连作为对照的input(只有被拉的蛋白)都没曝出来,请各位高手知道一下吧,谢谢。本人western 没有问题。 dianaofyezi 如果连对照都没有出来,就首先应该考虑程序流程的问题,无论是否发生了pull down,起码对照应该成立不是么?然后再考虑的是相互作用的蛋白的问题。
一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down:是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合,融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化:①
以下操作按照天根产品 DP320 新型植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片2. 研钵 液氮3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl ,200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 无水乙醇5. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和LP3中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
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