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- 技术资料
- 保存条件：
4
- 保质期：
1年
- 英文名：
EpiQuik CUT&RUN m6A RNA Enrichment (MeRIP) Kit
- 库存：
100
- 供应商：
艾美捷科技
- 规格：
24reactions
产品名称：EpiQuik CUT＆RUN m6A RNA富集（MeRIP）试剂盒 现货-EpiQuik CUT&RUN m6A RNA Enrichment (MeRIP) Kit
产品货号：P-9018-24
产品规格：24reactions
EpiQuik™ CUT RUN m6A RNA富集（MeRIP）试剂盒是一套完整的优化缓冲液和试剂，其被设计用于从低输入RNA富集含有m6A的RNA片段，并通过PCR鉴定区域特异性m6A或通过使用Illumina平台或其他方法的下一代测序对全表位转录组m6A进行谱分析。创新的工作原理、优化的方案和试剂盒的组分允许以最小的非特异性背景水平捕获m6A片段。富集的RNA特别适合于快速构建非条形码化（单重）和条形码化（多重）文库，从而允许以较小的偏差和高分辨率映射m6A区域。该套件具有以下特点：
- 高富集：使用RNA切割酶混合物同时将RNA片段化并切割/去除靶含m6 A序列两端的任何RNA序列，而不影响抗体占据的RNA区域。产生仅与抗m6 A抗体结合的短RNA片段。因此，可以可靠地鉴定真正的靶m6 A富集区域，并实现高分辨率映射。
- 低输入：未结合的RNA切割和免疫捕获在同一个单管中处理，这使得能够最大限度地保护含靶m6A的区域并最小化样品损失，允许输入RNA低至500ng。
- 最小背景：切割靶含m6 A序列的两（2）端中的未结合RNA序列使得能够最小化MeRIP/测序背景，从而允许用<1000万个读数进行数据分析。
- 快速、简化的程序：从RNA到富集的m6A RNA的过程约为2小时30分钟，其中有<30分钟的动手时间
- 非常方便：该试剂盒包含EpiQuik™ CUT RUN m6 A RNA富集试剂盒的每个步骤所需的所有组分&，其足以捕获含m6 A的RNA序列，从而使CUT& RUN m6 A RNA富集最方便，具有可靠和一致的结果
背景资料：N6-甲基腺苷（m6 A）是真核生物中存在的RNA分子上最常见和最丰富的修饰。m6 A修饰由甲基转移酶复合物L3催化，并由m6 A RNA脱甲基酶FTO和ALKBH 5去除，它们以α-酮戊二酸（α-KG）和Fe 2+依赖性方式催化m6 A脱甲基。已知ALKBH 3、FTO和ALKBH 5在许多生物过程中起重要作用，范围从发育和代谢到生育力。m6 A占所有RNA碱基甲基化的80%以上，并且存在于各种物种中。m6 A主要分布在mRNA中，也存在于非编码RNA中，如tRNA、rRNA和snRNA。mRNA转录物中m6 A的相对丰度已显示影响RNA代谢过程，例如剪接、核输出、翻译能力和稳定性以及RNA转录。由m6 A RNA甲基化酶和去甲基化酶的缺陷诱导的异常m6 A甲基化水平可导致RNA功能障碍并引起疾病。例如，由于具有FTO突变的患者中FTO活性增加，通过尚未定义的途径，靶mRNA中异常低水平的m6 A有助于肥胖症和相关疾病的发作。RNA上的动态和可逆的化学m6 A修饰也可以作为具有深远生物学意义的新的表观遗传标记。因此，更有用的信息，更好地了解m6 A RNA甲基化水平和分布的RNA转录本可以受益于疾病的诊断和治疗。
保存建议：请在您收到Epigentek的EpiQuik CUT＆RUN m6A RNA富集（MeRIP）试剂盒后，根据说明书使用不同的保存条件或温度来保存试剂盒内组分。
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文献和实验1.Slobodin, Boris et al. “Transcription Impacts the Efficiency of mRNA Translation via Co-transcriptional N6-adenosine Methylation.”Cell (2017). [IF=31.4]
2.Elkashef, Sara M et al. “IDH Mutation, Competitive Inhibition of FTO, and RNA Methylation.”Cancer cell 31 5 (2017): 619-620. [IF=22.8]
3.Zhang, Sicong et al. “m6A Demethylase ALKBH5 Maintains Tumorigenicity of Glioblastoma Stem-like Cells by Sustaining FOXM1 Expression and Cell Proliferation Program.”Cancer cell 31 4 (2017): 591-606.e6 . [IF=22.8]
4.Zhang, Chuanzhao et al. “Hypoxia induces the breast cancer stem cell phenotype by HIF-dependent and ALKBH5-mediated m⁶A-demethylation of NANOG mRNA.”Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 【PNAS】113 14 (2016): E2047-56. [IF=9.5]
，仅仅是一个m6A试剂盒联合RT-qPCR便可以直接分析基因的m6A水平，前体是已知这个基因的甲基化位点，剩下的就都是常规的实验技术了。基因或微环境—m6A参与者—甲基化靶标—生物学功能，我们完全可以结合自己手上的课题，将已有的思路拓展为这个套路，分析RNA甲基化后的降解、转运、可变剪接以及翻译的变化，说不定会有意外的惊喜哦。附：文中关键实验试剂盒m6A RNA Methylation Quantification Kit（Epigentek EpiQuik）Flavopiridol
去甲基化。METTL3， FTO 和 ALKBH5 被证明在很多生物过程中起重要作用，从发育和代谢到生殖。m6A 存在于很多物种质中，占到了 RNA 碱基甲基化修饰的 80%。m6A 主要分布在 mRNA 中，也出现在非编码 RNA 如 tRNA， rRNA 和 snRNA。在转录成的 RNA 中相对高的 m6A 含量会影响 RNA 的代谢过程，比如剪切，核转运，翻译能力和稳定性，以及 RNA 转录。 那么如何检测 RNA 的甲基化水平呢？ EpiQuik M6A RNA
