- ￥7380 - 11280
- ABCODE
- 国产
- AC24002
- 2025年12月29日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
部分保存于4℃，部分保存于-80℃
- 保质期：
6个月
- 库存：
20
- 供应商：
ABCODE
- 规格：
4 rxns/8 rxns
| 规格： | 4 rxns | 产品价格： | ￥7380.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 8 rxns | 产品价格： | ￥11280.0 |
这款产品用于完整细胞检测，适用于活细胞表面结合蛋白/靶标蛋白的筛选和发现，是一款膜蛋白受体鉴定的有效工具。
受体鉴定是生命科学研究中的重要问题。与可溶性蛋白质之间的蛋白质-生物分子相互作用相比，涉及受体-配体等膜蛋白的蛋白质-生物分子相互作用的研究更具挑战性，因为传统蛋白质鉴定方法中，维持蛋白质构象和活性较为困难。
SPIDER技术是一种新型邻近标记技术，可兼容活细胞，直接捕获细胞表面、处于天然状态的靶标蛋白，在受体鉴定领域具有显著的技术优势。当细胞膜表面的靶蛋白(Prey)与带有生物素标记的生物分子(Bait)发生相互作用时，会同时与偶联了生物素的SAm-PupE靠近，在 PafA 酶的催化作用下，PupE 的C末端会与Prey蛋白表面的赖氨酸残基共价相连，从而实现对靶蛋白的捕获。该过程将生物分子与蛋白质之间的非共价结合相互作用转换为SAm-PupE与靶蛋白的共价连接，从而能够稳定地用于后续靶蛋白的富集、鉴定和分析。
应用案例：
为了测试SPIDER识别细胞表面配体的能力，我们首先检验了SARS-CoV-2 S1蛋白与其已知受体ACE2之间的相互作用，SPIDER反应直接在培养皿中进行（如下图A），我们观察到SPIDER反应前后细胞死亡率无变化。通过显示ACE2-SAm-PupE的迁移变化确认了SARS-CoV-2 S1与ACE2之间的结合（如下图B）。
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文献和实验研究工作者的宝贵时间，QIAGEN推出了Ni-NTA Membrane Protein Kit，专门用于带有His标签的重组膜蛋白的溶解和后续纯化。 Ni-NTA Membrane Protein Kit有两部分组成，一部分是膜蛋白的溶解试剂，该部分包括7种最常用的去污剂，用于供客户筛选最适合自己的去污剂；另一部分是Ni-NTA纯化试剂，用于在膜蛋白溶解用，利用His标签和Ni-NTA的亲和特性进行进一步纯化。该试剂盒最大的优势在于帮助膜蛋白研究者在最短的时间筛选得到最优的去污剂，并且进行Ni-NTA纯化
看热闹，必须拿体内实验的数据兜底。 BioID/TurboID（邻近标记）：近朱者赤近墨者黑 前面两种技术都是把蛋白从细胞里拉出来再测。但如果是高度动态的过程，传统方法真的很难跟得上。 TurboID 的思路完全不一样：把一个生物素连接酶融合到目标蛋白上，让它待在活细胞里。只要周围大概 10 nm 范围内有别的蛋白路过，就会被这个酶"啪"地打上一个生物素标签。因为是共价标记，接下来你可以用最粗暴的裂解条件——SDS
分离后通过免疫沉淀或免疫印迹检测细胞内特定蛋白质的移动。例如，对某个细胞系中某个对质膜蛋白转运有影响的特殊因子感兴趣，可以用这个因子处理细胞，处理后的细胞通过离心富集。然后将处理过的细胞和没有处理过的细胞分别分离成不同组分。许多传统方法和商业试剂盒可以将细胞/组织分离成亚细胞结构例如胞浆，质膜，细胞器和细胞核。通过使用特异性抗体免疫印迹对比目标膜蛋白的分布。这种研究方法的基本要求是分离出的亚细胞组份必须相对干净。在市场上有许多细胞组分分离试剂盒，但是通常都具有显著的交叉污染，所以仔细选择细胞组分分离试剂盒
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SPIDER邻近标记 膜蛋白 Pull Down试剂盒说明书_V1.0.pdf 附 (下载 3 次)
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