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- 2025年11月20日
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上海再康
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产品应用：为方便广大科研人员对细胞凋亡检测的需求，我公司承接细胞凋亡原位检测的服务
产品介绍：
细胞凋亡原位检测试剂盒产品说明
凋亡是许多正常的生理过程所必需的，包括免疫系统的成熟和作用机制、组织器官和肢体的发生、神经系统的发生等过程。在许多病理条件下，凋亡机制的调节失衡起很重要的作用，包括组织细胞的缺血、缺氧、出血、中风、心脏病、癌症、艾滋病、自身免疫缺损和中枢神经系统的退行性变等。在癌基因的研究方面，由于细胞凋亡可由抗癌药物、放射及高热等启动，并且肿瘤细胞具有由于一些癌基因表达即能启动凋亡的内在特性，因此细胞凋亡已引起人们的广泛重视。
检测凋亡细胞的方法有数种。细胞凋亡过程中核酸内切酶的活化是关键的过程，导致核DNA被裂解成寡核苷酸大小的片段。因此，这个过程被用于检测凋亡，在琼脂糖凝胶电泳上出现典型的“DNA梯形带”。但是，这种方法既不能检测单个细胞水平的凋亡，又不能提供细胞发生凋亡所处的组织位置和细胞分化状态等方面的信息。 这一切可以由凋亡的原位酶标记方法来完成。DNA聚合酶和末端脱氧核糖核酸转移酶（TdT）用来标记DNA链断端的核酸，应用TdT进行的末端反应又称为ISEL或TUNEL技术，它与应用DNA聚合酶的ISNT（in situ nick translation）相比具有以下优点：灵敏度高、快速、优先标记发生凋亡的细胞，而不是坏死的细胞。
本试剂盒检测细胞凋亡分以下三个步骤：
1、标记DNA链断端，由TdT催化，以FITC标记的核苷酸为原料，进行非模板依赖方式的3?OH端DNA末端聚合反应；
2、用HRP或AP标记的羊抗FITC的抗体（Fab段）与聚合到DNA末端的FITC结合；
3、用酶的底物显色，HRP常用DAB显色，AP常用BCIP/NBT显色。
| 试剂1： | 酶浓缩溶液（Enzyme Solution） |
| 试剂2： | 标记溶液（Lable Solution） |
| 试剂3： | 转化剂-POD（Converter-POD） 酶标记抗荧光素抗体（即用型） |
细胞凋亡原位检测试剂盒试验所需其它试剂：
| 非石蜡切片 | ·冲洗缓冲液:磷酸盐缓冲液（PBS） ·阻断溶液:0.3%H2O2甲醇溶液 ·固定溶液:4%多 聚 甲 醛（溶剂pH7.4新鲜配制的PBS溶液） ·渗透液:0.1%Triton甔-100（溶于新鲜配制的0.1%枸橼酸钠溶 液） |
| 石蜡切片 | ·二甲苯和乙醇（100%、95%、90%、80%、70%用蒸馏水稀 释） ·冲洗缓冲液:磷酸盐缓冲液（PBS） ·蛋白酶K 工作液10~20mg/ml溶于10mM Tris/HCl（pH7.4~7.8） 根据需要选择: ·渗透液:0.1%TritonX-100（溶于新鲜配制的0.1%枸橼酸钠溶 液） ·胃酶溶液（0.25%-0.5%溶于HCl ，pH2）或胰酶 ·0.1M枸橼酸缓冲液，pH6，微波修复 |
zk-E10215 【中文名称】：人内肽-2(EM-2)ELISA试剂盒 【英文名称】：The people endomorphins -2 (EM-2) ELISA Kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10216 【中文名称】：人α-内肽(α-EP)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human α- endomorphins (α-EP) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10217 【中文名称】：人抑制素(INH)ELISA试剂盒 【英文名称】：Inhibin (INH) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10218 【中文名称】：人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human neuronal apoptosis inhibitory protein (NAIP) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10219 【中文名称】：人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human orexin / orexin B (OX-B) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10220 【中文名称】：人促睡眠肽(DSIP)ELISA试剂盒 【英文名称】：People sleep-promoting peptide (DSIP) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10221 【中文名称】：人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA试剂盒 【英文名称】：People 6 - hydrozkdopamine (6-OHDA) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10222 【中文名称】：人心纳素(ANF)ELISA试剂盒 【英文名称】：People ANF (ANF) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10223 【中文名称】：人神经髓鞘蛋白(p2)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human myelin protein (p2) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10224 【中文名称】：人精氨酸加压素(AVP)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human arginine vasopressin (AVP) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10225 【中文名称】：人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human pituitary adenylate cyclase activating peptide (PACAP) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10226 【中文名称】：人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human microtubule-associated protein 2 (MAP-2) ELISA Kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10227 【中文名称】：人神经丝蛋白(NF)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human neurofilament (NF) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10228 【中文名称】：人利钾尿肽(KP)ELISA试剂盒 【英文名称】：People kaliuretic peptide (KP) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10229 【中文名称】：人神经降压素(NT)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human neurotensin (NT) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10230 【中文名称】：人神经激肽B(NKB)ELISA试剂盒 【英文名称】：Human neurokinin B (NKB) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
zk-E10231 【中文名称】：人强啡肽(Dyn)ELISA试剂盒 【英文名称】：People dynorphin (Dyn) ELISA kit 【灵敏度】：9.375pg/mL
【灵敏度】：9.375pg/mL
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文献和实验细胞仪检测。 二、荧光显微镜原位检测 注：本方法优点是可以原位观察细胞凋亡，缺点是部分凋亡由于贴壁不牢而检测不到。 如果条件可以，在诱导凋亡后，用多孔板离心机300 g离心5 min。 吸除细胞培养液，用PBS洗涤两次（如果条件允许，在此前做步骤A）。 离心后弃上清，加入500 μL稀释成1 × 的Annexin V Binding Buffer工作液。 加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5μL的细胞核染色液。 移液器轻轻混匀，室温避光孵育15~20 min。 Annexin V Binding
ziweihua 求助高人啊，我想用斑马鱼整体胚胎检测其细胞凋亡情况，选用的Roche的in situ cell death detection kit, POD. 按照其中的贴壁细胞或细胞涂片的方法做了两遍，可是连阳性对照都没有信号。后来查找到一篇论文中的方法，如下： a，收集胚胎后用PBS清洗，转移到1.5ml的EP管内，4%多聚甲醛PBS固定过 夜 b，用PBS配制 25%50%75%的梯度酒精，每次5min将胚胎梯度脱水。
一、DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移（ISNT） 1．切片常规脱蜡，梯度乙醇复水化。 2．将切片组织浸入2×SSC液中，80℃，20min，然后蒸馏水冲尽。 3．0.5％胃蛋白酶（pH2.0）37℃消化0～20min，PBS洗尽。 4．用滤纸擦干组织块周边液体放入湿盒组织切片上滴加缓冲液A，5min。缓冲液A：50mmol/L Tris-HCl, 5mmol/L MgCl2, 10mmol/L β-巯基乙醇，0.005％BSA，pH7.5。 5．弃
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