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- 百欧泰
- 100% PET Particles-BSA, 15 um
- 2025年11月07日
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2-8℃
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100
- 供应商：
百欧泰
- 规格：
10ML
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文献和实验yzzaici888 大家好，本人最近一直在做p-p38的磷酸化，但是一直都做不好。希望各位大侠帮助解决： 蛋白上样量80-100ug，半干转膜70min，5%BSA封闭70min，一抗CST（#9211） 1：500加，4℃孵育过夜，二抗1:8000加室温70min。曝光出的结果很不好，杂带很多，也分析不出那条是目的条带，且没有趋势，见下图 15001046419
yukituki 最近做Akt的WB遇到了问题： 我用的是CST的Akt抗体以及pAkt抗体，染小鼠组织（肝，肾，脾，肺，脑等）。 5%BSA（TBST稀释）4度封闭过夜 之后一抗是5%脱脂牛奶稀释，1：500，过夜，二抗1：2000稀释，2-3h 染出来的片子很脏，而且Akt勉强可以见到，但是pAkt没染出来条带 提组织用的是RIPA（每100mg用500ul），加了PMSF以及NaF，冰上
（一）石蜡切片IGSS（1）切片脱蜡至水。（2）0.1%胰蛋白酶37℃消化20min或抗原修复20min（98℃），自然冷却至室温。（3）0.05mol/L（pH7.4）TBS洗3×3min.（4）l%EA（卵蛋白）15min,不洗。（5）适当稀释的特异抗体室温4h或4℃孵育20h,或37℃孵育1h.（6）0.05m01/L（pH7.4）TBS洗3×5min.（7）0.02m01/L（pH7.4）TBS（内含0.1%BSA）洗10min.（8）1%EA 15min,不洗，1:10~1:20稀释
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