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云舟生物科技(广州)股份有限公司
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定制服务
噬菌体展示是一种能在丝状噬菌体表面呈现短肽、蛋白质或抗体分子的强大技术,可用于对靶标特异性结合分子的高通量筛选。云舟生物专注于构建高质量的噬菌体展示文库,包括短肽文库和抗体展示文库可为您的药物研发、疫苗开发以及蛋白质相互作用研究提供有力支持。
亮点
抗体筛选服务可通过我们专有的高通量亲和力测量方法进行简化。服务详情

价格与周期

技术详情
云舟生物可构建短肽展示文库与抗体展示文库(如VHH、Fab、scFv)。这两类文库对于展示分子的大小和复杂度、载体骨架以及噬菌体组装方法上存在差异。
变异体来源
待展示的变异体可通过从头合成的方式或者从未经免疫/已免疫的动物获取。下表汇总了这些不同来源方式的关键特点:

文库骨架
两种噬菌体展示文库之间的另一个关键区别在于载体骨架的选择。
用于短肽展示的M13噬菌体载体
源于细菌噬菌体的载体,如M13KE噬菌体载体,通常用于短肽展示(最长50个氨基酸)。M13噬菌体的DNA以单链DNA形式包含完整的噬菌体基因组,其中约半数基因编码以衣壳蛋白(G3P、G6P、G7P、G8P和G9P),其余基因则对基因组复制、噬菌体组装和噬菌体释放过程至关重要(图1A)。

在该系统中,目的短肽将与噬菌体外壳蛋白G3P连接形成融合蛋白,然后被展示在噬菌体表面。这种方法相当适用于短肽的亲和力分析以及对高亲和力结合分子进行高效筛选(图1B)。将载体导入宿主E. coli细胞后,可实现重组噬菌体颗粒的组装与扩增,并最终获得高滴度的噬菌体展示文库。由于这些噬菌体载体包含完整的噬菌体基因组,因此无需辅助噬菌体即可产生功能完备的噬菌体颗粒。
用于抗体展示的噬菌粒载体
pComb3x及类似的噬菌粒载体常用于抗体展示文库构建(图2A)。pComb3x噬菌粒包含一个噬菌体外壳蛋白(如G3P)基因,该基因与外源DNA序列融合,可实现抗体片段或全长抗体的噬菌体表面展示(图2B)。然而,噬菌粒缺乏噬菌体组装所需的结构基因和复制基因,因此无法自主产生噬菌体颗粒。需借助辅助噬菌体提供缺失的噬菌体基因,重组噬菌体颗粒才能完成包装并被分泌。

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文献和实验与正常人的血清反应,从而建立起疾病的特异性诊断方法。3.构建 cDNA 文库一般可用 M13 噬菌体或其他 E.coli 的噬菌体作为 cDNA 文库的展示系统。cDNA 文库的噬菌体展示提供了一个应用免疫学方法进行筛选的条件,取代了细胞内表达 cDNA 文库然后挑选多个菌落的方法。由于 E.coli 只能有效表达一部分真核蛋白,而 M13 噬菌体和其他 E.coli 所能表达的真核蛋白更少。但无论如何,噬菌体表面 cDNA 文库的表达将是研究蛋白质之间相互作用的有用工具。4.构建噬菌体展示抗体
决定簇库中筛选出展示特异性抗原决定簇的噬菌体,这种血清只能与病人血清抗体反应,而不能与正常人的血清反应,从而建立起疾病的特异性诊断方法。 构建cDNA文库 一般可用M13噬菌体或其他E.coli的噬菌体作为cDNA文库的展示系统。cDNA文库的噬菌体展示提供了一个应用免疫学方法进行筛选的条件,取代了细胞内表达cDNA文库然后挑选多个菌落的方法。由于E.coli只能有效表达一部分真核蛋白,而M13噬菌体和其他E.coli所能表达的真核蛋白更少。但无论如何,噬菌体表面cDNA文库的表达将是研究蛋白质之间
,则可以通过荧光体之间的能量传递来确定两蛋白质的相互作用。 这种方法较之上述的方法有两个优点: (1)蛋白质之间的相互作用是发生在完整细胞里,比较完整地反映了蛋白质在生理状态的活动。 (2)利用这种方法,可以观察到蛋白质在细胞内的定位。 二、分子生物学方法 1. 噬菌体展示技术 噬菌体展示技术是在深刻理解噬菌体遗传学和生理学特性的基础上产生的。其原理是将蛋白质文库整合到一个简单的噬菌体颗粒中,利用目的蛋白质与特异配基的亲和力,筛选和配基特异结合的蛋白质。噬菌体展示技术一般要经过多
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