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天津国晟中源科技有限责任公司
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实验猪膝关节骨关节炎(OA)模型
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次
实验猪膝关节骨关节炎(OA)模型
通过外科手术切断膝关节前交叉韧带(ACL)+ 部分切除内侧半月板(MMx),破坏膝关节机械稳定性与软骨保护结构,模拟人类机械损伤→关节不稳→软骨渐进退变→骨赘形成的病理进程。
实验猪的膝关节解剖结构、软骨代谢机制与人类高度契合,能复现人类 OA 的 “软骨磨损、关节间隙狭窄、滑膜炎” 等核心特征,适合软骨保护剂、关节修复器械疗效评价,或 OA 疼痛机制研究。
一、实验方法
1、术前准备
猪种选择:优先选用巴马香猪。
术前评估:术前 1 周通过膝关节 X 线片排除先天关节畸形、骨赘;用关节活动度测量仪记录膝关节屈伸范围,筛选无关节活动受限的健康猪;
术前处理:术前 12 小时禁食、4 小时禁水;术前 30 分钟肌肉注射麻醉;
麻醉方案:采用 静脉诱导 + 吸入维持 + 气管插管
耳缘静脉注射丙泊酚 诱导麻醉,待角膜反射消失后,经口插入 8 号气管导管,连接呼吸机;
吸入1.5%-2% 异氟烷维持麻醉,全程监测心率、血压、血氧饱和度及体温。
2、手术诱导 OA
手术体位与消毒
猪侧卧固定于手术台,术侧后肢膝关节区域去毛,用碘伏 + 75% 乙醇交替消毒 3 次,铺无菌手术巾,暴露膝关节前侧。
关节腔暴露
沿膝关节前内侧做 3-4cm 纵切口,逐层分离皮下组织、浅筋膜,切开髌腱内侧缘,将髌骨向外侧脱位,充分暴露关节腔。
切断前交叉韧带(ACL)
用无齿镊轻柔提起 ACL,确认无血管附着后,用尖刀片从 ACL 中点切断,残留两端用 4-0 可吸收线标记;切断后活动膝关节,确认胫骨前移幅度增加。
部分切除内侧半月板(MMx)
识别内侧半月板,用半月板刀切除其前 1/3 部分,切除边缘用生理盐水冲洗。
关闭关节腔与切口
用生理盐水冲洗关节腔,确认无出血后,逐层缝合关节囊、浅筋膜、皮下组织及皮肤;切口涂抹碘伏,用无菌敷料包扎,术侧后肢用弹性绷带轻度固定。
3、术后护理
抗感染:术后连续 7 天肌肉注射头孢曲松钠,每日更换切口敷料,若出现红肿渗液,及时清创并涂抹莫匹罗星软膏;
疼痛管理:术后 3 天内,每日肌肉注射美洛昔康(0.2mg/kg),避免疼痛导致猪制动;
康复训练:术后第 4 天拆除弹性绷带,引导猪每日自由活动,每日记录活动时间;
体重监测:每周测量体重,若体重下降>10%,适当补充高蛋白饲料,避免营养不良影响软骨代谢。

4、成模周期
术后4周:膝关节软骨出现早期退变;
术后8-12 周:进入稳定 OA 期,软骨磨损达中重度,伴随滑膜炎、骨赘形成,适合开展指标检测;若需构建慢性 OA 模型,可延长至术后 24 周,观察骨赘增大、关节间隙狭窄的长期变化。
二、注意事项
1、避免损伤血管神经:ACL 周围有膝中动脉分支,切断时需远离血管,若出现出血,用止血钳钳夹 30 秒止血;
2、半月板切除剂量控制:切除超 1/2 内侧半月板易导致膝关节内翻畸形,切除不足 1/4 则关节不稳程度不够,需严格按 “前 1/3” 切除。
3、关节积液:术后若膝关节明显肿胀,用 10mL 注射器在关节外侧穿刺抽液;
4、肌肉萎缩:若猪术后长期卧地,每日人工辅助活动术侧后肢,促进血液循环与肌肉功能恢复。
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文献和实验「神药」二甲双胍又有新发现!JAMA 子刊揭示二甲双胍可显著降低骨关节炎风险
Diseases 的一项动物实验发现二甲双胍可通过激活 AMPK 信号来限制 OA 的发生和发展。二甲双胍在阻止 OA 的发生发展同时,还可缓解小鼠 OA 相关的疼痛敏感性,其对软骨保护作用主要是通过激活 AMPK 信号,同时二甲双胍对灵长类动物关节软骨具有保护作用,提示二甲双胍可在临床用于治疗 OA 患者。 近期,一项发表于 JAMA Network Open 一项大型的全国性(美国)回顾性队列研究,评估了接受二甲双胍与磺脲类药物治疗的糖尿病患者发生 OA 和关节置换的风险。 图片来源:文献截图 >>
1.4亿美元,即占总经费的百分之六十三以上。生产实验的动物专业公司就有30余个,已拥有实验小鼠品系250个,小型实验猪15种,豚鼠品系30余个,地鼠品系30余个,大鼠品系60余个,兔子14个品种,猴子50余种以及狗、猫、禽等。美国1981年用了各种品系的小鼠共8000万只;大鼠7000万只,豚鼠60-70万只,家兔60-70万只,非人灵长类3.4万只。根据全美国有关科学家的人数来计算,每人每年的平均使用量不少于1000只,美国现有高级实验动物专家50多人,中级实验动物科学专家6000多人。他们不但生产
之五十的任务要利用实验动物进行研究才得以完成。美国卫生署的肿瘤研究中心,每年的研究经费的2.2亿元,而需要利用实验动物进行研究的课题占1.4亿美元,即占总经费的百分之六十三以上。生产实验的动物专业公司就有30余个,已拥有实验小鼠品系250个,小型实验猪15种,豚鼠品系30余个,地鼠品系30余个,大鼠品系60余个,兔子14个品种,猴子50余种以及狗、猫、禽等。美国1981年用了各种品系的小鼠共8000万只;大鼠7000万只,豚鼠60-70万只,家兔60-70万只,非人灵长类3.4万只。根据全美国有关科学
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