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动物实验肺炎模型
鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是需氧的不发酵糖革兰阴性杆菌, 属条件致病菌, 主要引起 医 院 获 得 性 肺 炎, 尤 其 是 呼 吸 机 相 关 性 肺 炎( VAP ), 亦可引 起 血流感染、 脑膜炎、 腹膜炎、 伤口感染等多种感染 。
小鼠气管插管操作步骤 : 建立在耳窥镜直视下 小鼠气管插管方法。具体步骤如下:
注射菌液 :
气管插管成功后, 沿气管插管注射10μL鲍曼不动杆菌菌液, 吹打3次, 确保菌液全部进入小鼠肺 部。 小鼠在啮齿动物操作台竖立1min后, 缓慢放平操作台, 将小鼠放回饲养笼中。
肺组织细菌定量:
待麻醉小鼠全部苏醒,颈椎脱臼 法处死小鼠,无菌操作取出小鼠两肺,称重后每0.1g肺加入0.9mL生理盐水,组织匀浆机研磨,取100uL经系列稀释后接种于LB培养基培养16h后行菌落计数,继而计算出每克肺组织的细菌含量。
小鼠气管插管操作步骤 : 建立在耳窥镜直视下 小鼠气管插管方法。具体步骤如下:
- 采用1.25%2,2,2 三溴乙醇(25mg/kg)腹腔注射, 待小鼠麻醉后仰卧位固定小鼠 于啮齿动物工作台 上。
- 采用门齿环一端钩住小鼠门齿, 另 一端固定于操作台, 缓慢倾斜工作台至45°。
- 操作者右手持直头镊牵拉小鼠舌头, 左手持带电池手柄的耳窥镜, 耳窥镜尖端深入小鼠舌上, 透过耳 窥镜的放大镜, 操作者可观察到小鼠的声门 随呼吸而开启 、闭合。 在小鼠声门开启的瞬间, 操作者迅速 将已安装气管插管的气管内 导管插入气道, 并退出导管。 将喉镜紧贴气管插管口 , 若喉镜表面有雾气形 成表明插管成功。
注射菌液 :
气管插管成功后, 沿气管插管注射10μL鲍曼不动杆菌菌液, 吹打3次, 确保菌液全部进入小鼠肺 部。 小鼠在啮齿动物操作台竖立1min后, 缓慢放平操作台, 将小鼠放回饲养笼中。
肺组织细菌定量:
待麻醉小鼠全部苏醒,颈椎脱臼 法处死小鼠,无菌操作取出小鼠两肺,称重后每0.1g肺加入0.9mL生理盐水,组织匀浆机研磨,取100uL经系列稀释后接种于LB培养基培养16h后行菌落计数,继而计算出每克肺组织的细菌含量。
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