谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(DTNB法)

规格： 100次 谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(DTNB法) (Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit with DTNB)是碧云天自行研制的一种简单易行的通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GPx)活性的试剂盒。碧云天研发的DTNB法和传统的NAPDH法(S0056)相比，吸光度变化范围更大，有效改善了检测灵敏度和线性范围，能更有效地对Gpx进行酶活性定量分析。 绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中心组成部分。细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。 本试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(S0059S)配合使用，可定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。 谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内的过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用。细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。 谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。 谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。但以过氧化氢为底物进行检测会受同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的影响，因为过氧化氢酶的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。本试剂盒利用了一种间接测定的方法。参考下图，在GSH相对比较充足并有足量有机过氧化物存在的情况下，谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)可以催化GSH生成G SSG。如果谷胱甘肽过氧化物酶的用量在适当的范围内并成为反应的限速因素，就会有适量的GSH剩余，剩余的GSH可以和生色底物DTNB反应产生G SSG和黄色的TNB。此时，谷胱甘肽过氧化物酶活性的高低就决定了剩余的GSH的量，从而决定了黄色TNB形成的量，因此TNB的形成量和谷胱甘肽过氧化物酶的活力负相关。从而通过测定黄色TNB的吸光度就可以计算出谷胱甘肽过氧化物酶的活性。本试剂盒具体反应原理见下图，GPx为谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase)，R-OOH为过氧化物，TNB为黄色产物。