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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
宜明生物
- 服务名称:
mRNA synthesis and purification
一、服务概述
二、核心优势
- 序列优化设计:基于专业算法与数据库,针对不同应用场景(如原核表达、真核表达、基因编辑)进行密码子优化,优化 5' UTR、3' UTR 区域,提升 mRNA 翻译效率与稳定性,部分场景下蛋白表达量可提升 3 - 5 倍。
- 完整结构构建:通过加帽酶法或共转录加帽技术,实现高比例 Cap 1 结构(≥90%)添加;采用酶促反应或体外转录延伸合成标准长度 polyA 尾(50 - 200nt 可选),保障 mRNA 结构完整性,增强体内外翻译活性。
- 多重纯化工艺:结合磁珠捕获、阴离子交换层析、凝胶过滤等技术,有效去除未反应核苷酸、dsRNA、DNA 模板、酶等杂质,mRNA 纯度≥95%,内毒素含量<0.1 EU/μg,确保下游应用安全性。
- 定制化纯化方案:针对不同规模需求(从 μg 级科研样本到 mg 级生产需求),灵活调整纯化策略,同时支持去除特定杂质(如 dsRNA 残留),满足细胞转染、疫苗制备等差异化要求。
- 全流程质量监控:通过 Agilent Bioanalyzer 检测 mRNA 完整性(RIN 值≥8.5),毛细管电泳分析加帽率与 polyA 分布,Qubit 荧光定量测定浓度与纯度,zeta 电位评估颗粒稳定性,多维度数据保障产品质量可追溯。
- 快速交付与稳定批次:标准订单 7 - 10 个工作日内交付,加急服务最快 3 个工作日完成;每批次产品均提供完整质检报告,批次间 mRNA 性能差异<5%,确保实验重复性。
- 多样化修饰选项:支持多种化学修饰(如假尿苷、N1 - 甲基假尿苷),降低 mRNA 免疫原性;可添加特定标签(如 His - tag、Flag - tag)或荧光标记,满足蛋白表达检测、细胞示踪等特殊需求。
- 兼容多种模板类型:可基于客户提供的质粒 DNA、PCR 产物或合成基因作为模板,也支持直接提供序列委托合成模板,一站式满足从基因到 mRNA 的全流程需求。
三、服务规格与交付内容
| 服务项目 | 详情 |
| 合成长度 | 50 - 10,000 nt,支持长链 mRNA 合成 |
| 产量范围 | 10 μg - 5 mg(可定制更大规模) |
| 修饰类型 | 假尿苷、m1ψ、Cap 1/2 结构、polyA 尾长度定制 |
| 模板要求 | 质粒 DNA(浓度≥100 ng/μL)、PCR 产物(纯度≥90%)或序列委托合成 |
| 检测项目 | 检测周期 |
| PolyA Tail Length | 1周 |
| Capping efficiency | 1周 |
| Total Potein Residue | 1周 |
| Plasmid DNA Residue | 1周 |
| dsRNA residue | 1周 |
| Endotoxin assay | 1周 |
| Expression assay (WB,需客户自己提供细胞系、抗体和阳性对照) | 1周 |
| BioBurden | 2周 |
- 高纯度 mRNA 样本(无菌分装,干冰运输,-80℃可稳定保存 6 个月);
- 详细质检报告:根据需求可提供包含浓度、纯度、完整性、加帽率、polyA 分布、zeta 电位等检测数据;
- 实验操作手册:含 mRNA 溶解、储存、转染建议及注意事项;
- 原始数据文件:根据需求可提供电泳图谱、检测曲线等原始数据,便于客户回溯验证。
四、应用场景
- 基因治疗与细胞治疗:合成编码治疗性蛋白(如酶、细胞因子)的 mRNA,用于体内基因递送;制备 CAR - mRNA,实现 T 细胞体外重编程,加速细胞治疗产品研发。
- 疫苗开发:支持 COVID - 19、流感、肿瘤等多种 mRNA 疫苗研发,提供修饰优化、大规模合成与纯化服务,助力临床前及临床研究。
- 基础科研:用于基因功能验证、蛋白瞬时表达、CRISPR - Cas 系统递送,替代传统质粒转染,降低基因整合风险,提升实验效率。
- 药物筛选与毒理研究:合成特定靶点 mRNA 用于体外细胞模型构建,加速药物活性评估与毒性测试进程。
五、服务流程与技术支持
- 需求沟通:客户提交 mRNA 序列、修饰要求、应用场景及产量需求,技术团队评估可行性并提供方案报价;
- 序列设计与模板准备:优化 mRNA 序列,根据需求合成模板或处理客户提供模板;
- 合成与纯化:通过体外转录合成 mRNA,经多步纯化去除杂质;
- 严格质控:完成全项质量检测,确保符合交付标准;
- 快速交付:附带质检报告与实验指导,干冰运输至客户指定位置。
- 全程技术咨询:提供序列设计建议、修饰方案选择、实验条件优化等专业指导;
- 售后问题解决:针对 mRNA 转染效率低、表达异常等问题,提供远程或现场技术支持;
- 定制化服务:根据客户特殊需求(如罕见修饰、特殊载体适配),提供专属解决方案。
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