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Umibio,专注于外泌体研究!
外泌体是什么?
外泌体(Exosome)是由细胞内多泡体与细胞膜融合后,释放到细胞外的一种直径约30~150nm的膜性囊泡。学术界主流观点认为外泌体的产生过程为:细胞膜内陷形成内体,然后再形成多泡体(MVB),最后分泌到细胞外成为外泌体。研究表明,所有类型哺乳动物细胞在培养过程中都可以分泌产生外泌体。外泌体是细胞分泌的膜性囊泡;外泌体是由活细胞分泌的一种亚细胞成分,由磷脂双分子及其携带的膜性分子组成;其主要成分为蛋白质、酶、mRNA、miRNA、DNA片段和脂质等。
Umibio服务优势:
- 经验丰富,做外泌体研究早,近10年的研究经验积累;
- 案例丰富,接触的样本类型很多,能针对性的进行操作;
- 专心专注,只做外泌体领域,始终坚持外泌体深度研究;
- 独立自主,从提取到鉴定,检测及后续研究,独立完成;
- 诚信做事,完善的数据记录体系,实验结果经得起考验。
外泌体鉴定
1: 粒径NTA:通过NTA粒径检测看囊泡颗粒数和颗粒范围 (设备: NS300)
2: 粒径 纳米流式:通过纳米流式NanoFCM检测看囊泡颗粒数和颗粒范围 (设备:NanoFCM)
3:电镜TEM:通过TEM透射电镜检测看清外泌体典型形态 (设备:HT7700)
4:WB检测:通过WB检测CD63或TSG101等鉴定外泌体标志蛋白;
操作过程:外泌体蛋白浓度测定BCA+一个抗体一张膜进行检测;
目前可做抗体:CD63、CD81、TSG101、CD9、Alix等抗体;

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文献和实验注:如同时要求外泌体抽提、鉴定及蛋白质组学,请将样本要求量进行加和。 备注:请明确提供的样本体积。细胞上清及尿液,超过 50ml,每 50mL 算作一个 1 个样本,以此计算样本数,核算抽提周期。血清、血浆、关节液、脑脊液进行超速离心,每 5mL 算作 1 个样本,以此计算样本数,核算抽提周期。
TEM 透射电镜是外泌体鉴定的金标准,对于所有做外泌体的朋友们来说,是必经之路,基于很多老师们的呼声,我们的研究人员,经过细致化整理,把所有的操作过程都整理出来,供各位参考,经验有限,有不当之处,还请多多沟通。 一、首先,我们看看电镜的原理是啥? 然后,电镜的结构也是比较复杂的! 二、那么,我们看看样品有哪些要求?样品要求:1、能被电子束穿透(薄)2、耐电子束轰击3、有磁性的样品不可以放置4、长纤维样品若需上样需加盖铜网 三、接下来,我们看看规范化拍摄 Umibio 是怎么操作
三、干细胞来源外泌体的功能分析: 中南大学湘雅医院罗湘杭课题组在《ACS Nano》上发表研究,发现年老小鼠的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)分泌的外泌体中 miR-29b-3p 含量显著增高,其下游靶基因 SIRT1 的表达水平明显下降。miR-29b-3p 可调节衰老相关的胰岛素抗性,可能将会成为与衰老相关胰岛素抗性的潜在治疗靶点。 图八 骨髓间充质干细胞来源的外泌体鉴定 图九 干细胞来源外泌体的 miRNA 水平分析 南京医科大学第一附属医院蔡卫华课题组在《Acta
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