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北京百泰派克生物科技有限公司
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可溶性酸性磷酸化核蛋白
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可溶性酸性磷酸化核蛋白的研究进展
可溶性酸性磷酸化核蛋白(soluble acidic phosphorylated nuclear proteins)是一类具有重要生物学功能的核内dànbáizhì,其显著特征在于可溶性、酸性等电点以及磷酸化修饰。这类dànbáizhì广泛存在于真核生物细胞核中,参与多种关键的细胞过程,包括基因表达调控、染色质重塑、DNA损伤修复以及细胞周期调控等。其酸性特性主要来源于富含天冬氨酸和gǔānsuān的氨基酸序列,而磷酸化修饰则通过激酶和磷酸酶的动态调控影响其功能。可溶性酸性磷酸化核蛋白的异常表达或修饰与多种疾病密切相关,如癌症、神经退行性疾病和自身免疫性疾病,因此成为生物医学研究的热点之一。
从结构上看,可溶性酸性磷酸化核蛋白通常含有特定的功能域,如核定位信号(NLS)、磷酸化位点以及与其他dànbáizhì或核酸相互作用的区域。这些结构特征使其能够灵活地响应细胞内外的信号,并通过构象变化或翻译后修饰调节其活性。例如,某些可溶性酸性磷酸化核蛋白在细胞应激条件下会发生快速磷酸化,进而招募其他修复因子至DNA损伤位点。此外,这类dànbáizhì的丰度和修饰状态常受到严格的调控,其失调可能导致基因组不稳定或转录异常。
在研究方法上,可溶性酸性磷酸化核蛋白的分离和鉴定通常需要结合多种技术手段。由于其在细胞内的丰度可能较低,且易受蛋白酶降解,因此在样本制备过程中需特别注意保持其完整性和磷酸化状态。免疫沉淀(IP)和质谱(MS)联用是分析可溶性酸性磷酸化核蛋白的常用策略,而磷酸化特异性抗体的使用则有助于研究其修饰动态。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定。此外,近年来发展的蛋白zhìzǔxué技术为高通量研究可溶性酸性磷酸化核蛋白的互作网络和修饰谱提供了有力工具。
可溶性酸性磷酸化核蛋白的功能研究也受益于基因编辑和活细胞成像技术的进步。例如,通过CRISPR-Cas9敲除或突变特定磷酸化位点,可以揭示其在信号通路中的具体作用。同时,荧光标记技术使得研究人员能够在活细胞中实时观察可溶性酸性磷酸化核蛋白的定位和动态变化。这些方法不仅深化了对这类dànbáizhì生物学功能的理解,也为开发靶向干预策略奠定了基础。
常见问题:
Q1. 可溶性酸性磷酸化核蛋白的磷酸化修饰如何影响其与DNA的相互作用?
A:磷酸化修饰可通过改变dànbáizhì的电荷分布或构象,调节其与DNA的亲和力。例如,某些可溶性酸性磷酸化核蛋白在磷酸化后酸性增强,从而与带正电荷的组蛋白竞争结合DNA,影响染色质结构和基因转录。
Q2. 在癌症中,可溶性酸性磷酸化核蛋白的异常修饰有哪些常见的分子机制?
A:癌症中常见的机制包括激酶(如AKT、ERK)的异常激活导致过度磷酸化,或磷酸酶(如PP2A)的功能缺失。这些变化可能破坏可溶性酸性磷酸化核蛋白的正常功能,促进细胞增殖或基因组不稳定性。
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文献和实验,共有 441 个氨基酸残基,其他亚型的结构及标记如下图。其中 K18 和 K19 是截短的 Tau 蛋白,仅含有微管结合重复区域。和 α- 突触核蛋白 PFFs(Pre-formed Fibrils) 相似的是,Tau PFFs 也被称为「种子」,有催化可溶性 Tau 蛋白聚集形成纤维缠结的作用。而与 α- 突触核蛋白 PFFs 不同的是,Tau PFFs 在正常神经细胞中的催化作用要慢得多,这是因为突变的 α- 突触核蛋白单体(A53T)在正常神经细胞中就存在,并且集中于神经突触前体末端,而突变
。大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取(如 RIPA 裂解液),但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分,即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中[1,2] 。也就是说利用溶液法提取的并非是完整的总蛋白,而仅仅是一些可溶性蛋白。那使用 RIPA 等溶液法提取的不完整总蛋白做实验,到底会不会影响我们磷酸化蛋白检测和定量研究呢?我们来一起讨论下。Brady 等人中
Rachel1123 求助各位高手,RIPA裂解液提取的蛋白可以用于做STAT3的wb吗?还是需要专门提取核蛋白? 多谢! 顺便再问一句,stat3在胃癌细胞SGC7901中是否高表达? wangfanyun RIPA裂解液可以做stat3的WB。不需要专门提取核蛋白! zfyyzz00 一般来说,stat是转录因子,只有磷酸化的stat才有活性,它通过形成二聚体的形式进入
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