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- 2026年01月07日
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珠海舒桐医疗科技有限公司
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液相杂交捕获AAV整合位点检测
液相杂交捕获检测技术基于碱基互补配对原理，通过设计和合成特异性核酸探针，针对AAV质粒和宿主基因组中的整合区域进行靶向捕获。首先，根据客户提供的AAV质粒设计合成针对AAV质粒全长的特异性探针，待检测的DNA样本需先构建预文库。随后，将预文库与探针进行液相杂交并使用链霉亲和素磁珠进行捕获，从而富集含有AAV序列和宿主基因组序列的整合片段。最后，通过PCR扩增进一步增强整合位点的信号强度并构建最终的测序文库[3]。
相比于仅关注ITR区域的传统方法，该方法采用AAV质粒全长制备特异性探针的检测策略能够更全面地捕捉到AAV的整合情况，进一步提高了AAV整合位点检测的全面性和灵敏度[3]。
图1. 液相杂交捕获检测AAV病毒载体整合流程示意图
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，例如液相杂交，高通量检测，靶mRNA无须扩增。与real-time PCR相比，nanostring只需单步反应，比real-time PCR操作更简便，且通量也比real-time PCR更高。总之，NanostringnCounter仪器所需样本更少、无需酶反应、操作更简便，是现有的表达谱检测手段的重要补充。 NanostringnCounter仪器一经问世大受欢迎，并已在nature、science、cell等顶级杂志发表多篇文章，目前已将应用扩展至miRNA、IncRNA、CNV和融合
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了垂体单位在肿瘤免疫中的作用。为此构建了皮下移植瘤小鼠模型并检测了垂体激素的水平变化，皮下移植的细胞系包括免疫检查点疗法耐药的细胞系（LLC 肺癌细胞和 GMCSF 过表达的 B16F10 黑色素瘤细胞）和免疫检查点疗法敏感的细胞系（MC38 结肠癌细胞系和 MCA205 纤维肉瘤细胞）。结果发现，荷瘤小鼠模型血清中 α 促黑激素（α-MSH）的产生明显增加（图 1 A，B）。阿黑皮素原（POMC）经加工可产生 α-MSH，且正常情况下 POMC 主要在垂体中表达（图 1 C）。相比于对照组小鼠
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