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外泌体包含什么
外泌体是由细胞主动分泌的纳米级(30-150 nm)胞外囊泡,其核心组成包括脂质双分子层、dànbáizhì、核酸及其他生物活性分子。在脂质组成上,外泌体包含dǎngùchún、鞘磷脂、磷脂酰sīānsuān等,这些脂质不仅维持其结构稳定性,还参与细胞间信号传递。dànbáizhì成分可分为三类:跨膜蛋白(如CD9、CD63、CD81等四跨膜蛋白家族)、胞质蛋白(如热休克蛋白HSP70、HSP90)以及参与外泌体生物发生的蛋白(如ESCRT复合物相关蛋白)。核酸组分则涵盖功能性mRNA、miRNA、lncRNA和circRNA,甚至少量DNA片段,这些分子可通过外泌体介导的递送机制调控受体细胞的基因表达。此外,外泌体还包含代谢产物(如乳酸、bǐngtóng酸)和酶类(如金属蛋白酶),其具体组成因细胞来源和生理状态而异。
外泌体包含什么的分析通常依赖超速离心、尺寸排阻色谱或免疫亲和捕获等技术分离纯化,随后通过质谱、高通量测序或Western blot进行表征。例如,蛋白zhìzǔxué可鉴定外泌体包含的差异表达蛋白,而小RNA测序能揭示其携带的miRNA谱。外泌体包含的核酸分子具有高度选择性,如肿瘤来源外泌体常富含促癌miRNA(如miR-21),这为疾病标志物开发提供了依据。具体费用需要根据实验需求和样品情况来确定,但技术核心在于确保外泌体的完整性和纯度,避免共沉淀污染物干扰分析结果。
外泌体包含的生物分子与其功能密切相关。例如,神经元来源的外泌体包含突触相关蛋白(如GAP-43),可能参与神经再生;而间充质干细胞外泌体包含的TGF-β可调节免疫反应。近期研究还发现,外泌体包含的线粒体DNA(mtDNA)可能与炎症性疾病相关。这些发现推动了外泌体在药物递送、诊断和治疗领域的应用探索。
常见问题:
Q1. 外泌体包含的核酸是否具有细胞类型特异性?
A:是的。外泌体包含的核酸(如miRNA)谱可反映亲本细胞的生理状态。例如,肝细胞外泌体富含miR-122,而心肌细胞外泌体则高表达miR-1,这种特异性使其成为潜在的器官损伤标志物。
Q2. 如何验证外泌体包含的dànbáizhì功能?
A:可通过基因敲除或过表达亲本细胞的关键基因,结合外泌体蛋白zhìzǔxué分析差异蛋白。此外,体外功能实验(如受体细胞共培养)可验证特定蛋白(如外泌体包含的Wnt蛋白)的信号激活能力。
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文献和实验外泌体(Exosomes)作为当前科研界的热度话题,很多人觉得它很神秘,不知道它在疾病治疗或发生、发展中扮演什么样的角色,今天我们跟大家一起基于文献来探讨一下外泌体具有的功能。 先回顾一下外泌体的基础知识。外泌体是细胞分泌到胞外的一种囊泡(Extracellular Vesicles,EVs),其大小为 30-150 nm,具有双层膜结构和茶托状形态,含有丰富的内含物(包括核酸、蛋白和脂质等),参与细胞间的分子传递。 所有的细胞都能分泌外泌体,但是不同细胞分泌的外泌体不管在数量
细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心,3000g,15min; 3.离心后样本(有略微沉淀) 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层; 震荡混匀; 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上,离心 10000g,60min; 6.离心后的样本(沉淀明显,沉淀中富含外泌体) 将上清吸出留下沉淀,将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液; 7.加 PBS 重悬沉淀; 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
近年来外泌体是一个比较热的研究点,本节课介绍了外泌体的项目情况、胞外囊泡、Evs理化特征、外泌体组分、外泌体功能等知识点。
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