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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
保存在-20℃,避光,保持密闭,1年。如有结晶需在37℃,水浴溶晶。稀释液C:常温(RT),或冰箱保存,保持无菌。
- 保质期:
保存在-20℃,避光,保持密闭,1年。如有结晶需在37℃,水浴溶晶。稀释液C:常温(RT),或冰箱保存,保持无菌。
- 英文名:
PKH67 Green Cell Membrane Staining Kit
- 库存:
999
- 供应商:
北京索莱宝科技有限公司
- 规格:
0.1ml/1ml/5ml
| 规格: | 0.1ml | 产品价格: | ¥880.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1ml | 产品价格: | ¥4400.00 |
| 规格: | 5ml | 产品价格: | ¥15000.00 |
荧光染料PKH67(λex=490nm,λem=502nm)是?种适用于常规细胞膜标记的绿色荧光染料,可以稳定的与细胞膜脂质区结合并发出荧光,主要用于细胞体外标记、体外细胞增殖研究以及体内外的细胞示踪研究。
PKH67对细胞毒性较小,不影响细胞的增殖能力,荧光背景低,脂溶性高,能够轻易穿透细胞膜,有着强而稳定的绿色荧光。
经PKH67标记的细胞可?于体外和体内增殖研究,且具有不会使邻近细胞染色的功能。在细胞分裂增殖过程中,PKH67的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。
PKH67标记细胞的荧光非常均一,并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均一。在细胞分裂增殖过程中,PKH67标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,荧光强度变为亲代细胞的一半,通过流式细胞仪根据荧光强度的不同,可检测出未分裂细胞,分裂一次(1/2的荧光强度),二次(1/4的荧光强度),三次(1/8的荧光强度),以及更多分裂次数的细胞。PKH67可检测分裂次数多达六次甚至更多。
除了用于细胞增殖检测,PKH67还可以用于细胞的体外和体内示踪,标记后荧光在胞内表达稳定,阳性标记率达98%以上,标记细胞形态良好,能有效地观察细胞在体外的诱导分化情况;
还可以将标记的细胞注入体内,可以有效的显示移植细胞在活体组织中的迁移及分化。PKH67标记的细胞用于体内观察可以长达数周之久,它常被用来做活体细胞检测实验和用荧光电镜观察细胞长期活动的实验。
此方法操作简单,且不用放射性同位素,不存在安全隐患。可以更快速,更准确和更安全地获得实验数据。
PKH67的体内荧光半衰期为10-12天。PKH67标记细胞后通常用流式细胞仪或者荧光显微镜进行细胞增殖检测。
答:您好,暂时没有验证过用于外泌体的试验。
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文献和实验主要分为两大类,第一类是 PKH67(绿色荧光)/PKH26(红色荧光),由于它们可以与外泌体的脂质双层膜稳定结合,所以染色效果较好,应用较广泛。 图1 PKH67 标记的外泌体与神经元之间相互作用 Acta Neuropathol Commun. 2018 Feb 15;6(1):10. 图2 PKH26 标记的外泌体与 MDA‐MB‐231 细胞共培养 Cancer Sci. 2019 Oct;110(10):3173-3182. 第二类是 Di 系列的亲脂性染料,包括DiI(橙色荧
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actin 摄取实验对比,图 Fig.4a 中可以看到 CellLINK 555 标记的清晰的红色膜轮廓,经过 EvLINK 505 标记后的绿色外泌体分散在细胞膜内;Yu 等使用 F-actin 标记细胞膜轮廓,PKH-67 标记外泌体,尽管共聚焦显微镜下观测到的外泌体明亮的绿色荧光,然而该绿色荧光呈弥散状分布,难以较好区分外泌体与细胞膜。 Fig.4 (a)EvLINK 505 标记的外泌体+CellLINK 标记细胞膜和(b)PKH-67 标记的外泌体+F-actin 标记细胞膜摄取
到大量纳米颗粒,可能是胶束和聚集体,颗粒分布在80-400 nm,与外泌体所在的粒径区间(30-150 nm)存在交集,这与之前报告的结果一致[2, 3]。PKH聚集而成的纳米颗粒自身的荧光干扰不容忽视,Lai 等人[4]研究表明用 PKH67 染色(没有 EV)甚至比 PKH67 染色的 EV 具有更强的荧光信号,这些同样具有荧光的纳米颗粒会“伪装”成外泌体,影响标记阳性率、外泌体粒径分布和细胞摄取结果。 Fig.1 NTA视频观察到大量聚集的PKH颗粒 2. 弥散造成的假阳
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