μCaler® Total Solution for Met

μCaler^® 靶向甲基化测序全流程解决方案，搭载独家专利的 μCaler^® 液相杂交捕获系统，可在单日内完成全部流程，操作简单便捷。该解决方案捕获转化后的甲基化文库，采用专利型探针设计方案，可覆盖所有甲基化状态的靶标；此外，针对甲基化优化的杂交捕获体系，不仅适配于 mini Panel 的靶向富集，更适用于 AT-rich 等特殊区域的捕获。

μCaler® Hybrid Capture Reagents v2 是针对小 Panel 的靶向富集及多种类型的预文库的杂交捕获而优化设计，搭配 μCaler® NanoBlockers 及基于创新型方案设计的 μCaler® Panel 构成完整的液相杂交捕获体系，能够在单日内完成捕获文库构建的全流程。

方案推荐

方案特色

• 精准检测大规模 CpG 位点：一次性检测多种癌症的多个基因的 CpG 位点，实现精准联合检测
• 精确定量甲基化水平：高精度覆盖 0-100% 不同甲基化状态样本的精准定量
• 高速便捷操作：实验流程简化，操作便捷，单日内完成全部流程
• 稳定高效捕获：避免数据量不一致，确保捕获测序结果的稳定性，降低返工风险
• 更低测序成本：采用混杂模式，简化杂交捕获数量，降低测序成本，提升经济效益

方案表现

精准检测大规模 CpG 位点

图 1. 含不同规模 CpG 位点的定制 Panel 的 μCaler^® 靶向甲基化测序表现。人类基因组 DNA 标准品 (Promega, G1471) 利用 NadPrep^® Methyl Library Preparation Module 搭配 NadPrep^® Methyl Stubby Adapter (UDI) Module (with 10 nt Index) 和 NadPrep^® DNA Methyl Bisulfite Conversion Module 构建预文库，以 μCaler^® Methyl Cervical Cancer Panel (MCC) 和 μCaler^® Methyl Multiple Cancer Panel (MMC) 完成杂交捕获，Illumina^® Novaseq 6000，PE 150 测序，每个样本随机选取 1 Mb reads pair 用于数据分析。A. MCC 捕获表现；B. MCC CpG 位点的覆盖深度；C. MMC 捕获表现；D. MMC CpG 位点的覆盖深度。

注：MCC 覆盖区域约 1.4 Kb，包含 125 个 CpG 位点； MMC 覆盖区域约 3.6 Kb，包含 336 个 CpG 位点。

精确定量甲基化水平

图 2. 模拟样本经不同方法检测的甲基化水平。利用 50 ng 不同甲基化水平的模拟样本构建预文库，500 ng/预文库投入，以 MMC 完成杂交捕获。A-E. 分别为 0%，2%，10%，50% 和 100% 不同甲基化水平模拟样本的检测结果。
注：样本为人甲基化阳性对照 (Methylated DNA, Zymo, D5014-2) 与阴性对照 (Non-Methylated DNA, Zymo, D5014-1)，按不同比例混合以模拟不同甲基化水平。μCaler：μCaler^® 靶向甲基化测序； Pyro：焦磷酸测序。

高速便捷操作

稳定高效捕获

图 3. μCaler^® 靶向甲基化测序对小 Panel 的捕获表现。 利用人类基因组 DNA 标准品 (Promega, G1471) 构建预文库，500 ng/预文库投入，分别以 MBT、MMC 和 MPC 完成杂交捕获。A. 捕获数据的比对率和中靶率；B. 靶区域 CpG 位点覆盖度；C. C 碱基的转化率；D. CpG 位点的甲基化水平。

注：MBT 覆盖区域约 1.2 Kb，包含 159 个 CpG 位点；MPC 覆盖区域约 6.2 Kb，包含 620 个 CpG 位点。

更低测序成本

图 4. 不同混合杂交方式下的 μCaler^® 靶向甲基化测序的捕获表现。利用人类基因组 DNA 标准品 (Promega, G1471) 构建预文库，500 ng/预文库投入，以 MCC 完成杂交捕获。A. 靶区域 CpG 位点覆盖度；B. CpG 位点的甲基化水平。

真实样本应用示例

图 5. 不同技术路线对临床真实样本的检测结果比较。 A. 高甲基化水平样本 (Tumor) 的检测结果；B. 低甲基化水平样本 (Normal) 的检测结果；C. 7 号染色体 (Chr 7) 相关 CpG 位点甲基化水平。
注：μCaler^® 靶向甲基化测序以 MBT 完成杂交捕获。

本产品仅限研究使用，不用于临床诊断。