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- 2026年01月22日
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NadPrep® DNA Methyl Bisulfite Conversion Module 是基于亚硫酸氢盐转化原理针对 DNA 样本开发的甲基化转化试剂。该转化 模块基于磁珠纯化的方案可在 2 hr 内将未甲基化的胞嘧啶高效转化为尿嘧啶，且利于自动化开展；同时可衔接纳昂达 NadPrep® 双链 甲基化文库构建方案和 NadPrep® 单链甲基化文库构建方案，支持在多种类型的起始样本中灵活选择。
产品特色
- 兼容多类型样本且支持宽泛的投入量范围
- 胞嘧啶转化率高效稳定
- 卓越的 5mC 和 5hmC 检测灵敏度
- 操作便捷利于自动化开展
亚硫酸氢盐转化流程
*接头连接产物示意图以 NadPrep® Methyl Stubby Adapter (UDI) 为例。
产品表现
文库产出及转化效率
图 1. 不同投入量样本的文库产出及转化效率。人类男性基因组 DNA 标准品 (Promega, G1471) 利用 NadPrep® Methyl Library Preparation Module 搭配 NadPrep® Methyl Stubby Adapter (UDI) Module (with 10 nt Index) 和 NadPrep® DNA Methyl Bisulfite Conversion Module 构建文库，Illumina Novaseq 6000， PE 150 测序。A. 文库产出；B. 转化效率。
捕获表现
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文献和实验的后果是不仅没有RNA，连DNA也被消化了。两者均于-20℃保存。验证提取DNA的纯度的方法有二：1、紫外分光光度计计算OD比值；2、1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。第二种方法优于第一种方法，这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度，并根据Marker的上样量估计其浓度，以用于下一步的修饰。第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA如不特别指出，所用双蒸水（ddH2O）均经高压蒸汽灭菌。1、将约2μgDNA于1.5mlEP管中使用ddH2O稀释至50μl；2、加5.5ul新鲜配制的3M NaOH
。否则可能的后果是不仅没有RNA，连DNA也被消化了。两者均于-20℃保存。验证提取DNA的纯度的方法有二：1、紫外分光光度计计算OD比值；2、1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。第二种方法优于第一种方法，这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度，并根据Marker的上样量估计其浓度，以用于下一步的修饰。第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA如不特别指出，所用双蒸水（ddH2O）均经高压蒸汽灭菌。1、将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用ddH2O稀释至50μl；2、加5.5ul新鲜配制的3M NaOH
和转化、蓝白斑筛选 1：连接T载体（本实验使用的是Promega的试剂盒） 15ul体系 T-easy 1ul Ligase 1ul 2xbuffer 7.5ul DNA 5.5ul 4度，过夜。 2：连接产物的转化 1）-70度冰箱内取出感受态细菌，融化后置于冰上； 2）连接产物15ul 全部加入，至于冰上30分钟； 3）42度， 90秒钟； 4）冰上2分钟； 5）800ul LB培养基； 6）280rpm，37度，摇床45分钟（将管放
