- ￥2945
- 翌圣生物（Yeasen）
- 12604ES24
- 上海
- 2026年03月27日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
24T
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格（元） |
| Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module 快速DNA连接模块 |
12604ES24 |
24 T |
3263.00 |
| 12604ES96 |
96 T |
10863.00 |
|
| 12604ES98 |
960T |
87663.00 |
产品描述
Hieff NGS® Ultima DNA Ligation Module是针对Illumina®与MGI®高通量测序平台文库构建专业设计的DNA连接模块，其中最大的亮点为本产品采用一款我公司自主研发的高效连接酶Fast T4 DNA ligase。本产品可在双链平末端DNA片段或双链3´-dA DNA片段的两端连接Illumina®与MGI®测序平台适用的DNA接头，具有连接效率高、简便、可实现自动化等优势。
本产品已与Hieff NGS® Ultima Endperp Mix（Cat#12605），2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12621）共同用于DNA文库构建，通过Illumina®高通量平台测序验证其有效性。
本产品已与Hieff NGS® Ultima Endprep Mix（Cat#12605）、2×Ultima HF Amplification Mix for MGI®（Cat#13344）共同用于DNA文库构建，通过MGI®高通量平台测序验证其有效性。
本产品中提供的所有试剂组分，都经过严格的质量与功能验证，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
产品组分
| 产品编号 |
组分名称 |
产品编号/规格 |
||
| 12604ES24 |
12604ES96 |
12604ES98 |
||
| 12604-A |
Fast T4 DNA Ligase |
120 μL |
480 μL |
4.8 mL |
| 12604-B |
5×Fast Ligation Buffer |
480 μL |
2 × 960 μL |
2 × 9.6 mL |
运输与保存方法
冰袋运输。
-20℃保存，效期一年。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！
使用方法
1. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量。表1列举了使用本试剂盒，不同Input DNA量推荐的Adapter使用量。
表1 . 500 pg-1 μg Input DNA推荐的Adapter使用浓度
| Input DNA |
Adapter : Input DNA摩尔比 |
Input DNA |
Adapter : Input DNA摩尔比 |
| 1 μg |
10:1 |
50 ng |
100:1 |
| 500 ng |
20:1 |
25 ng |
200:1 |
| 250 ng |
40:1 |
1 ng |
200:1 |
| 100 ng |
100:1 |
500 pg |
400:1 |
【注】：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]。
2. 目前主流的合并法DNA建库试剂盒，其末端修复和加A处理后一般不纯化，直接进行接头连接。本试剂盒可与主流的商业化末端修复加A体系兼容，进行接头连接。反应体系请参考如下配制，涡旋瞬离后置于20℃，反应15分钟即可。
表2 . Adapter Ligation体系
| 名称 |
体积（μL） |
| dA-tailed DNA |
60 |
| 5×Fast Ligation Buffer |
20* |
| Fast T4 DNA Ligase |
5 |
| DNA Adapter |
X** |
| ddH2O |
To 100 |
【注】：*对于5×Fast Ligation Buffer，请上下颠倒、振荡，充分混匀并瞬时后离心使用。
**根据自身需求加入适量的接头。
【接头添加计算举例】：当Input DNA为100 ng，Input DNA长度为300 bp时，接头应该添加多少？
第一步，计算Input DNA摩尔数。公式：Input DNA摩尔数（pmol）≈ Input DNA质量(ng)/ [0.66 × Input DNA平均长度（bp）]；
Input DNA 摩尔数（pmol）=100÷（0.66×300）=0.5 pmol；
第二步，计算接头添加摩尔数。根据注意事项三表2查询接头添加比例
根据表2，查得Input DNA 100ng时接头添加比例100:1，则接头添加摩尔数=100×0.5 pmol=50 pmol；
第三步，计算接头添加体积。接头浓度=15 μmol/L（如使用其他接头，浓度需要依据其他接头浓度参数）；
接头添加体积=接头添加摩尔数（50 pmol）÷接头浓度（15 μmol/L）=3.34 μL（注：15 μmol/L=15 pmol/μL）
综上，接头可添加3.4 μL，加1.6 μL水补齐至5 μL。（注：接头最大加入体积不超过5 μL）
HB210810
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶，反应10分钟。平滑末端连接：在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时，或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外，NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1：在25°C条件下，用1 unit（1:400稀释后取1 µl）T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
杂交，随后用带有荧光标记的抗DIG抗体与之反应。与双CG的探针获得杂交的标本含有甲基化，而与TG探针杂交的标本未被甲基化。通过比较斑点上荧光的强度测定甲基化水平。 这种方法的优点是快速、简便、易于掌握，可一次检测多种样本，包括石蜡包埋样本。缺点是：1. 检测序列不能过长；2. 若探针错误杂交或重亚硫酸盐处理不完全，则可能出现假阳性或假阴性结果。 2.2.12 甲基化特异性多连接依赖性探针扩(Methylation-Specific multiplex ligation-dependent
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息，可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用：实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上，通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子（FANCE和MGMT）甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
