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- AAT Bioquest
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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Cell Meter™ Caspase 8 Activity Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence*
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
200Tests
| Ex (nm) | 500 | Em (nm) | 522 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 8的活性而用于细胞凋亡检测的。Caspase 8 是一种Caspase蛋白，CASP8基因所编码。在神经元变性疾病中，例如亨廷顿综合症，caspase 8扮演着重要角色。Caspase 8已被证明具有底物选择性，其肽基序为Ile-Glu-Thr-Asp (IETD)。该试剂盒使用(Ac-IETD)2-R110作为荧光指示器来检测caspas-8的活性。通过caspas-8的切割R110肽产生强绿色荧光，其发射光在520 nm和530 nm之间，激发光为480 nm和500 nm之间。这种特性使得试剂盒能适合于FITC滤光器。本试剂盒提供所有必需组分和操作流程。该实验结果稳定，快速且适应高通量筛选。它不仅能够定量凋亡细胞中caspas-8的活性还能筛选caspas-8的抑制剂。，为您提供优质的Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒。
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适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 顶/底读模式 |
样品实验方案
简要概述
1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 8工作溶液（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）
3.在室温下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光增加（截止= 515 nm）
工作溶液配制
将50μLCaspase8底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 8工作溶液。 避光。 注意：Caspasae 8工作液不稳定，请及时使用。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。
操作步骤
1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在5％CO 2,37℃培养箱中孵育所需的一段时间（对于用喜树碱或星形孢菌素处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。
3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 8工作溶液。
4.将板在室温下孵育30分钟至1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 8工作溶液10分钟前，向选定的样品中加入1μL的1 mM Ac-IETD-CHO caspase 8抑制剂，以确认对caspase 8样活性的抑制作用。
5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。
6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光增加。
数据分析
| 图1.使用Cell Meter Caspase 8活性细胞凋亡检测试剂盒检测Jurkat细胞中的caspase 8活性。 在Costar黑壁/透明底96孔板中以相同的以200,000个细胞/90μL/孔接种Jurkat细胞。 用或不用20μM喜树碱处理细胞4小时。 加入半胱天冬酶8工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用FlexStation 酶标仪（Molecular Devices）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止值= 515nm）下测量荧光强度。 |
参考文献
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Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
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Journal: Oncotarget (2016)
microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
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文献和实验，从而我们可从计算出Caspases 的活性。本试剂盒提供细胞裂解液、反应缓冲液、底物等所需试剂。 11、Caspase-3 Activity Detection Kit，Fluorometric（绿色荧光） 目录号：QIA91 包装：100T/Kit 本试剂盒为您提供了一种灵敏而方便的、可用于各种物种来源的活细胞中已活化的Caspase-3 检测的手段；整个实验过程仅需1.5 小时。本试剂盒的所使用的荧光标记物是一种可以透过细胞膜而且无细胞毒性的抑制剂，在凋亡的细胞中可以不可逆地与已经
细胞术已经成为凋亡分析的重要检测手段。PharMingen公司提供了许多从多种角度研究凋亡的试剂系统，包括小鼠、大鼠和人类蛋白抗体：Fas和Fas配体、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信号蛋白；再有，提供了多种流式细胞仪检测试剂盒，包括：Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit；另外，还提供了mRNA分析试剂——RiboQuant Rnase
细胞亚群之间的免疫突触 3. 使用非干扰试剂测量肿瘤细胞的死亡和对肿瘤细胞增殖的抑制作用 图3 利用Incucyte®免疫细胞杀伤试验查看免疫细胞/肿瘤细胞相互作用。(1)细胞毒性T细胞和红色荧光标记的肿瘤细胞之间的相互接触。T细胞分裂。(2)肿瘤细胞受到细胞毒性T细胞的攻击：“死亡之吻”。(3) 追踪肿瘤细胞凋亡（caspase 3/7绿色荧光标记）、核固缩和细胞死亡。(4)肿瘤细胞分裂。 图4 使用Incucyte® FabFluor-488试剂，在共培养体系中查看
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