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- AAT Bioquest
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
Cell Meter™ Caspase 3/7 Activity Apoptosis Assay Kit *Green Fluorescence*
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
200Tests
| Ex (nm) | 500 | Em (nm) | 522 |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细胞凋亡的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒是通过测量Caspase 3/7的活性而用于细胞凋亡检测的。因为Caspase-3 (CPP32/apopain)在细胞凋亡的起始过程中发挥着重要作用，因此其作为一个值得信赖的细胞凋亡指示剂广泛地被大家所接受。Caspase 3具有特异性的底物多肽识别序列，即天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)。本试剂盒用Z-DEVD-Rh 110-DVED-Z作为Caspase-3活性的荧光指示剂。通过Caspase 3作用，断裂Rh 110多肽，产生具有强烈绿色荧光的Rh 110，检测其在520-530 nm处的荧光强度，其激发光波长在480-500nm处。本试剂盒提供所有必需组分和佳检测方案。本检测法强大、稳定，能够用于多种荧光研究平台的高通量分析中，例如微孔板分析，免疫组化和流式细胞术。使用时96孔板时，每孔用100ul试剂，本试剂盒提供的试剂足够进行200次检测；用384微孔板时，每孔加25ul试剂，本试剂盒提供的试剂足够进行800次检测。，为您提供优质的Cell Meter Caspase 3/7活性细胞凋亡检测试剂盒。
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适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 490 nm |
| Em： | 525 nm |
| Cutoff： | 515 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 读取模式: | 顶/底读模式 |
样本实验方案
简要概述
1.用测试化合物（100μL/孔/ 96孔板或25μL/孔/ 384孔板）制备细胞
2.加入等体积的Caspase 3/7工作溶液
3.在室温下孵育1小时
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度（截止= 515 nm）
工作溶液配制
将50μLCaspase3/7底物（组分A）加入10mL测定缓冲液（组分B）中并充分混合以制备Caspase 3/7工作溶液。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。
操作
1.通过将10μL/孔的10X测试化合物（96孔板）或5μL/孔的5X测试化合物（384孔板）加入PBS或所需缓冲液中来处理细胞。对于空白孔（没有细胞的培养基），加入相同量的化合物缓冲液。
2.将细胞板在37℃，5％CO2，培养箱中孵育所需的一段时间（对于用喜树碱处理的Jurkat细胞，4-6小时）以诱导细胞凋亡。
3.加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Caspase 3/7工作溶液。
4.将板在室温下孵育至少1小时，避光。注意：如果需要，在室温下加入Caspase 3/7工作溶液10分钟后，将1μL1mM Ac-DEVD-CHO caspase 3/7抑制剂加入到选定的样品中，以确认抑制半胱天冬酶3/7样活动。
5.以800rpm离心细胞板（特别是对于非贴壁细胞）2分钟（制动关闭）。
6.用荧光酶标仪在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）下监测荧光强度。
数据分析
| 图1. Jurkat细胞中半胱天冬酶3/7活性的检测。 Jurkat细胞在以80,000个细胞/孔/90μL接种在黑色壁/透明底96孔板中。 用或不用20μM喜树碱处理细胞5小时，和/或用5μM半胱天冬酶3/7抑制剂AC-DEVD-CHO处理细胞10分钟。 加入半胱天冬酶3/7工作溶液（100μL/孔）并在室温下温育1小时。 使用NOVOstar仪器（BMG Labtech）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止值= 515nm）下测量荧光强度。 |
参考文献
Hypertonicity primes malignant melanoma cells for apoptosis
Authors: Diana Nicoleta Calance, Charlotte Steixner, Stefanie Gross, Beatrice Schuler-Thurner, Gertrud Knoll, Martin Ehrenschwender
Journal: Apoptosis (2018): 1--9
Angiopoietins Modulate Survival, Migration, and the Components of the Ang-Tie2 Pathway of Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) Cells In Vitro
Authors: Luis Mario Aguirre Palma, Hanna Flamme, Iris Gerke, Karl-Anton Kreuzer
Journal: Cancer Microenvironment (2016): 13--26
Hypoxia regulates TRAIL sensitivity of colorectal cancer cells through mitochondrial autophagy.
Authors: Gertrud Knoll, Sebastian Bittner, Maria Kurz, Jonathan Jantsch, Martin Ehrenschwender
Journal: Oncotarget (2016)
microRNA-186 inhibits cell proliferation and induces apoptosis in human esophageal squamous cell carcinoma by targeting SKP2
Authors: Wei He, Jianfang Feng, Yan Zhang, Yuanyuan Wang, Wenqiao Zang, Guoqiang Zhao
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Journal: Human & Experimental Toxicology (2016): 0960327116650006
Glucose promotes cell proliferation, glucose uptake and invasion in endometrial cancer cells via AMPK/mTOR/S6 and MAPK signaling
Authors: Jianjun Han, Lu Zhang, Hui Guo, Weiya Z Wysham, Dario R Roque, Adam K Willson, Xiugui Sheng, Chunxiao Zhou, Victoria L Bae-Jump
Journal: Gynecologic oncology (2015): 668--675
IL-7 abrogates the immunosuppressive function of human double-negative T cells by activating Akt/mTOR signaling
Authors: Andrea Allgäuer, Elisabeth Schreiner, Fulvia Ferrazzi, Arif B Ekici, Armin Gerbitz, Andreas Mackensen, Simon Völkl
Journal: The Journal of Immunology (2015): 3139--3148
Insulin improves osteogenesis of titanium implants under diabetic conditions by inhibiting reactive oxygen species overproduction via the PI3K-Akt pathway
Authors: Lin Wang, Xiong Zhao, Bo-yuan Wei, Yi Liu, Xiang-yu Ma, Jian Wang, Peng-chong Cao, Yang Zhang, Ya-bo Yan, Wei Lei
Journal: Biochimie (2015): 85--93
LGL1 modulates proliferation, apoptosis, and migration of human fetal lung fibroblasts
Authors: Hui Zhang, Neil B Sweezey, Feige Kaplan
Journal: American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2015): L391--L402
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文献和实验，从而我们可从计算出Caspases 的活性。本试剂盒提供细胞裂解液、反应缓冲液、底物等所需试剂。 11、Caspase-3 Activity Detection Kit，Fluorometric（绿色荧光） 目录号：QIA91 包装：100T/Kit 本试剂盒为您提供了一种灵敏而方便的、可用于各种物种来源的活细胞中已活化的Caspase-3 检测的手段；整个实验过程仅需1.5 小时。本试剂盒的所使用的荧光标记物是一种可以透过细胞膜而且无细胞毒性的抑制剂，在凋亡的细胞中可以不可逆地与已经
细胞术已经成为凋亡分析的重要检测手段。PharMingen公司提供了许多从多种角度研究凋亡的试剂系统，包括小鼠、大鼠和人类蛋白抗体：Fas和Fas配体、TRAIL和DR3/DR4、Bcl-2家族、Caspase酶家族及其它信号蛋白；再有，提供了多种流式细胞仪检测试剂盒，包括：Caspase-3 Assay Kit、APO-BRDU和APO-DIRECT Kit、Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit；另外，还提供了mRNA分析试剂——RiboQuant Rnase
细胞亚群之间的免疫突触 3. 使用非干扰试剂测量肿瘤细胞的死亡和对肿瘤细胞增殖的抑制作用 图3 利用Incucyte®免疫细胞杀伤试验查看免疫细胞/肿瘤细胞相互作用。(1)细胞毒性T细胞和红色荧光标记的肿瘤细胞之间的相互接触。T细胞分裂。(2)肿瘤细胞受到细胞毒性T细胞的攻击：“死亡之吻”。(3) 追踪肿瘤细胞凋亡（caspase 3/7绿色荧光标记）、核固缩和细胞死亡。(4)肿瘤细胞分裂。 图4 使用Incucyte® FabFluor-488试剂，在共培养体系中查看
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