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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
APC-Cy7 Tandem
- 库存:
50
- 供应商:
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格:
1mg
| Ex (nm) | 651 | Em (nm) | 779 |
| 分子量 | ~105000 | 溶剂 | Water |
| 存储条件 | 在2-8度冷藏保存, 避免光照 |
产品基本信息
产品名称:串联染料APC-Cy7
储存条件:2-8℃避光防潮
保质期:6个月
产品物理化学光谱特性
分子量:N/A
外观:固体
溶剂:水
激发波长(nm):651
发射波长(nm):780
产品介绍
串联染料APC-Cy7是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。别藻蓝蛋白(APC)是从螺旋藻(一种蓝绿藻)中分离的藻胆蛋白。与其他藻胆蛋白一样,APC是荧光的,具有极高的吸收率和高量子效率。它是一种蛋白质,通过常规蛋白质交联技术可以很容易地与抗体和其他蛋白质连接,而不会改变其光谱特征。APC-Cy7是流式细胞仪中常用的颜色。其主要吸收峰位于651nm,发射峰位于~780nm。AAT Bioquest还提供独特的预活化APC-Cy7,以促进APC-Cy7串联结合抗体和其他蛋白质,如链霉抗生物素蛋白和其他二级试剂。我们的预活化APC-Cy7串联已准备好结合,产生比常规繁琐的基于SMCC的缀合化学高得多的产率。,为您提供优质的串联染料APC-Cy7。
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参考文献
Chromophore attachment to phycobiliprotein beta-subunits: phycocyanobilin:cysteine-beta84 phycobiliprotein lyase activity of CpeS-like protein from Anabaena Sp. PCC7120
Authors: Zhao KH, Su P, Li J, Tu JM, Zhou M, Bubenzer C, Scheer H.
Journal: J Biol Chem (2006): 8573
Excitation energy transfer from phycobiliprotein to chlorophyll d in intact cells of Acaryochloris marina studied by time- and wavelength-resolved fluorescence spectroscopy
Authors: Petrasek Z, Schmitt FJ, Theiss C, Huyer J, Chen M, Larkum A, Eichler HJ, Kemnitz K, Eckert HJ.
Journal: Photochem Photobiol Sci (2005): 1016
Single-molecule spectroscopy selectively probes donor and acceptor chromophores in the phycobiliprotein allophycocyanin
Authors: Loos D, Cotlet M, De Schryver F, Habuchi S, Hofkens J.
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Evaluation of Tolypothrix germplasm for phycobiliprotein content
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Isolation and characterisation of phycobiliprotein rich mutant of cyanobacterium Synechocystis sp
Authors: Prasanna R, Dhar DW, Dominic TK, Tiwari ON, Singh PK.
Journal: Acta Biol Hung (2003): 113
Co-ordinated expression of phycobiliprotein operons in the chromatically adapting cyanobacterium Calothrix PCC 7601: a role for RcaD and RcaG
Authors: Noubir S, Luque I, Ochoa de Alda JA, Perewoska I, Tandeau de Marsac N, Cobley JG, Houmard J.
Journal: Mol Microbiol (2002): 749
Phycobiliprotein genes of the marine photosynthetic prokaryote Prochlorococcus: evidence for rapid evolution of genetic heterogeneity
Authors: Ting CS, Rocap G, King J, Chisholm SW.
Journal: Microbiology (2001): 3171
Novel activity of a phycobiliprotein lyase: both the attachment of phycocyanobilin and the isomerization to phycoviolobilin are catalyzed by the proteins PecE and PecF encoded by the phycoerythrocyanin operon
Authors: Zhao KH, Deng MG, Zheng M, Zhou M, Parbel A, Storf M, Meyer M, Strohmann B, Scheer H.
Journal: FEBS Lett (2000): 9
Phycobiliprotein-Fab conjugates as probes for single particle fluorescence imaging
Authors: Triantafilou K, Triantafilou M, Wilson KM.
Journal: Cytometry (2000): 226
[Phycobiliprotein and fluorescence immunological assay]
Authors: Wu P.
Journal: Sheng Li Ke Xue Jin Zhan (2000): 82
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文献和实验Cy5.5激发波长为675nm,不能被红色激光器所激发,也就不存在Cy5.5对APC的干扰,所以用PE-Cy5.5对APC计划没有串色。因此,可能需要牺牲个别荧光染料的亮度来避免荧光渗漏以及分辨率下降。 要通过单标对照进行补偿调节: 所以尽量选择光谱重叠度小的荧光染料,如FITC/PE-Cy7; 选择不同激光激发的荧光染料,如FITC/APC, PE/APC。 4) 尽量避免偶联荧光染料使用带来的假阳性 随着颜色的数量不断增加,实验中可能会用到串联荧光染料
流式配色可以算的上是一门艺术:我们需要平衡抗原表达水平和荧光染料亮度,从而得到令人满意的实验结果。 在荧光素的选择上,除了传统的 PE、APC 等荧光蛋白和 FITC 等合成类小分子外,串联染料的出现大大扩展了可用荧光素的选择范围。 什么是串联染料? 串联染料由两个共价连接的荧光分子组成。当供体荧光分子的发射光谱与受体荧光分子的吸收光谱重叠,并且两个分子的距离在 10 nm 以内时,就会发生一种非放射性的能量转移,即荧光共振能量转移(FRET)现象,使得供体的荧光强度比它单独存在时要低的多(荧
式染色带来的影响我们才能更好的做好流式实验。固定对荧光染料的影响是什么?主要表现在固定剂对串联染料(tandem-dye,如 APC/Cy7、PE/Cy7 等)的影响:一个是固定剂有可能造成串联染料的断裂,比如 APC-Cy7 和 4%PFA 接触时间超过 4 个小时染料就有可能断裂,所以如果细胞直接重悬在固定液里面建议尽快上机,如果要放到第二天上机,需离心去除固定液后重悬在流式染色液或者是 PBS 里面,当然有一些新的串联荧光素可以有效减少这种情况,比如 BioLegend 的 APC/Fire750TM
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