Amplite 比色法酪胺酸检测试剂盒

样品实验方案

简要概述

1.准备和添加标准品和样品（50μL）
2.准备并添加酪氨酸酶蓝工作溶液到标准品和样品孔（50μL）
3.将板在室温下孵育60至120分钟
4.检测510nm处的吸光度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1酪氨酸酶原液（2000 U / mL）：
将120μL测定缓冲液（组分B）加入酪氨酸酶标准品（组分A）中并充分混合。 注意：将未使用的酪氨酸酶原液储存在-20°C，一次性使用等分试样。

1.2酪氨酸酶蓝原液（100X）：
将50μLDMSO（组分D）加入酪氨酸酶蓝（组分C）中并充分混合。 注意：将未使用的酪氨酸酶蓝原液在-20°C下以一次性等分试样储存。

 

2.标准溶液

酪氨酸酶标准
使用酪氨酸酶原液（2000 U / mL）和测定缓冲液产生400 U / mL终浓度的酪氨酸酶标准溶液（T1）。 然后进行1：2连续稀释以获得剩余的连续稀释的酪氨酸酶标准品（T2-T7）。 注意：井中标准品的终浓度为2X。 注意：使用提供的标准，如果使用建议的浓度，可以重复生成2条标准曲线。

 

3.工作溶液

酪氨酸酶蓝工作溶液：
通过将5μL酪氨酸酶蓝原液（100X）加入1mL测定缓冲液（组分B）中进行1：100稀释并充分混合。

 

样品分析

T1	T1	TS	TS
T2	T2
T3	T3
T4	T4
T5	T5
T6	T6
T7	T7
T8	T8

表1.白色透明底96孔微孔板中酪氨酸酶标准品和测试样品的布局。 酪氨酸酶标准品（TS1-TS8 = 200至0U / mL），TS =测试样品

1.以下协议可用作指南，应根据需要进行优化。

2.根据测定缓冲液中的建议制备标准品和测试样品，分别加入50ul到微孔板中。

3.将50μL酪氨酸酶蓝工作溶液加入标准品和样品的孔中。

4.将反应在37℃孵育60至120分钟。 注意：反应可保持长达6小时。

5.用光吸收酶标仪在510 nm处检测吸光度。

 

参考文献

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