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- AAT Bioquest
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
MycoLight™ Fluorescence Live/Dead Bacterial Imaging Kit
- 库存：
50
- 供应商：
广州市左克生物科技发展有限公司
- 规格：
100Tests
| Ex (nm) | - | Em (nm) | - |
| 分子量 | - | 溶剂 | - |
| 存储条件 | - |
MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测细菌的试剂盒，AAT Bioquest的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒提供双色荧光检测，通过荧光显微镜观察活细菌和死细菌。MycoLight 520是一种非荧光酯酶底物，可扩散到革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌中。在细菌细胞内非特异性酯酶水解后，产生绿色荧光产物并在细菌内积累。相比之下，碘化丙锭是一种红色荧光核酸染色剂，只能穿透受损膜的细菌。因此，使用MycoLight 520和碘化丙锭染料的适当混合物，具有完整细胞膜的活细菌发出绿色荧光，而具有受损膜的死细菌产生红色荧光。MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒是一种用于对活/死细菌进行成像的强大工具。可以在Ex / Em = 488 / 525nm（FITC滤光器组）和540 / 620nm（TRITC滤光器组）下荧光测量染色细胞，分别用于活细菌和死细菌。，为您提供优质的MycoLight 荧光活/死细菌成像试剂盒。
适用仪器
| 荧光显微镜 | |
| Ex: | 488/540 nm |
| Em： | 530/620 nm |
| 推荐孔板: | 黑色透明底板 |
| 通道: | FITC/TRITC 通道 |
染色样品示例
概述
1.准备100X MycoLight 520原液
2.准备细菌样本
3.加入MycoLight 520和碘化丙锭
4.将细菌样品与MycoLight 520和碘化丙啶在37°C孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟
5.用FITC和TRITC滤光片组通过荧光显微镜分析样品
注意：在开始实验之前，在室温下解冻所有试剂盒组分
操作步骤
1.MycoLight 520原液（100X）：
将100μLDMSO（组分D）加入MycoLight 520（组分A）的小瓶中。
注意：将储备溶液储存在-20°C，避免光照，反复冻融。
2.制备浓度为106至108个细胞/ mL的细菌样品。 在适当的培养基中将细菌培养到对数晚期。
注意：测量波长= 600 nm（OD600）的细菌培养物的光密度以确定细胞数。 对于大肠杆菌培养物，OD 600 = 1.0等于8×108个细胞/ ml。
4.通过用70％乙醇处理30分钟，然后煮沸60分钟，可以制备死细菌。
5.2充分混合并在37℃下在黑暗中孵育5-10分钟或在室温下孵育60分钟以获得佳染色结果。
5.3通过FITC（Ex / Em = 488 / 530nm）和TRITC（Ex / Em = 540 / 620nm）通道用荧光显微镜监测细菌的荧光。
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文献和实验CRISPR 是一种基因编辑技术，由 Cas 核酸酶和 sgRNA 组成，可以对生物的 DNA 序列进行定向切割、修改，被 Nature 杂志列为 2013 年年度十大科技进展之一。 而将 CRISPR 与荧光成像结合，就可以建立一个活体成像系统，实现对特定基因位点标记成像，并进一步在基因的生物学功能研究中发挥着重要的作用。 在活细胞中实时监测内源基因活性对于研究基因的生物学功能并调控其表达水平至关重要。近年来越来越多证据表明，低表达基因虽然表达量较低，但是在各种生物学过程中
，然后第二天用 NucView 550 (Biotium) 施用不同浓度的星形孢菌素（STS）。NucView 550 是 caspase-3 荧光探针，死细胞核用红色荧光染色。用 STS 和 NucView 550 处理后，将 HT-29 微球用 4% 多聚甲醛固定并用 0.5%Triton X-100 / PBS（-）通透性处理。微球的细胞核在 4°C（39.2°F）下用 Hoechst 33342 过夜染色。染色后，用 SCALEVIEW-S4 将微球透明化。 成像和分析 我们使用 FV
研究应用｜使用 NanoBiT 技术进行的蛋白质相互作用细胞内定位成像
和 NLS-FKBP/RRB NanoBiT 的细胞内定位 实验条件： 显微镜：IXplore Live for Luminescence 显微镜系统 相机：imagEM EM-CCD 相机 (Hamamatsu Photonics) 物镜：LUCPLFLN60XPH 成像透镜：0.35X EM 增益：1200 呋喃嗪浓度：1/200 稀释 西罗莫司最终浓度：30 nM 曝光时间：相衬 50 ms/生物发光 3 min/荧光 100 ms 图 4 显示了西罗莫司刺激前后的 NLS-FKBP
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