内质网蓝色荧光探针(活细胞成像用)北京厂家

特别提示：包括内质网蓝色荧光探针(活细胞成像用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：内质网蓝色荧光探针(活细胞成像用)
英文名称：ER-Tracker Blue-White DPX
产品货号：KM0045
产品规格：50μL|5×50μL

本品为ER-Tracker Blue-White DPX的DMSO储存液，浓度为1mM。用于活细胞内质网染色，建议工作浓度为100nM-1μM，需根据实际情况做优化调整。

ER-Tracker dyes是一系列细胞膜渗透性的活细胞染料，高度选择性结合内质网（ER）。不同于传统的内质网染料DiOC6(3)，该系列染料极少染色线粒体，且低浓度下染色无细胞毒性。使用提供的优化步骤对细胞染色和甲醛处理后，可以保留部分的活细胞染色特征。

ER-Tracker Blue-White DPX是Dapoxyl(DPX)染料家族的成员之一，这类染料具有长发射波长，高吸光系数，高量子产量和宽广的斯托克频移特征。这类染料属于环境敏感型的探针，随着溶剂极性的增加，最大荧光迁移到更长的波长，伴随着光量子产量降低。

主要参数：
分子式：C26H21F5N4O4S
分子量：580.5283
外观：黄色液体
Ex/Em：374/430-640nm(in methanol)
检测滤片：DAPI or UV longpass
保存：≤-20oC避光干燥保存，收到货至少6个月有效。

注意事项：
1．整个染色过程中需注意避光。
2．由于ER-Tracker Blue-White DPX是环境敏感型探针，会产生波动较大的发射吸收峰，在430-640nm之间出现。长通DAPI滤光片观察效果最理想。
3．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法：
以下实验方案是根据牛肺动脉内皮细胞（BPAE）优化所得，且已验证适用于其他常规细胞系的染色。建议以下步骤仅作起始实验的参考，请根据具体的细胞类型和实际情况来优化标记条件。

一、试剂准备
ER-Tracker Blue-White DPX以1mM的DMSO储存液形式提供，使用前请将ER-Tracker Blue-White DPX从冰箱内取出，确保回温至室温后，经短暂离心将所有溶液沉到管底。

二、细胞染色
1．制备染色工作液：将1mM ER-Tracker Blue-White DPX稀释至工作浓度，建议工作浓度100nM-1μM。为了最小化染料过高引起的假象，建议使用能达到实验目的的最低浓度来完成染色。
注意：在含Ca2+/Mg2+的Hank"s平衡盐溶液（HBSS/Ca/Mg,Cat# KM0185）内进行染色可得到最佳结果。
2．细胞染色：对于贴壁细胞，吸除培养基，用HBSS清洗细胞，加入预热的染料工作液，37℃孵育15-30min。吸除染色液，加入不含探针的新鲜培养基，并在荧光显微镜下观察细胞。如果细胞需要固定，请跳转到步骤三。

三、细胞固定及透化
1．固定和透化细胞：用4%甲醛于37℃固定细胞10-20min。ER-Tracker Blue-White DPX染色信号在甲醛固定后仅能部分保留下来。如果还需要做其他染色，细胞需用0.2%TritonX-100透化处理10min。
2．清洗和观察细胞：细胞固定后，用合适缓冲液清洗2次，每次5min。之后荧光显微镜下观察。

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