免疫荧光五标（TSA）

TSA多重免疫荧光染色的实验步骤

实验流程：多靶点免疫荧光染色的实验操作与普通单标记免疫组化流程相似。试剂盒中的荧光染料可以在HRP酶的作用下将信号共价结合到抗原上，随后即可衔接下一轮单标染色，直至全部标记完成，即可复染DAPI后封片观察。1.脱蜡水合：1）新鲜二甲苯浸片10min,重复3次。2）梯度乙醇浸片，100% 5min；95% 5min；70% 2min。3）灭菌水洗片1min，重复3次。4）10%中性福尔马林浸片10min，灭菌水洗片1min，重复3次。2.微波修复：1)将脱蜡水合后的玻片置于修复杯中，用抗原

免疫荧光组织（细胞）化学技术系列五：荧光抗体的质量控制

1、染色特异性和敏感性的测定方法（1）特异性染色和效价测定直接染色法中效价以倍比稀释如1：2、1：4、1：8……，与相应抗原标本作一系列染色，荧光强度在“+++”的最大稀释度，为其染色滴度（效价）或单位。实际染色时，可取低一个或两个稀释度（即2~4个单位），如染色效价为1：64，实际应用时可取1：32或1：16。间接染色法中效价可按抗核抗体荧光染色法步骤，先用不同稀释度的荧光抗体染色，结果以抗核抗体荧光强度“++”为标准，染色用效价和直接法相同。（2）非特异性染色测定根据荧光抗体的用途不同

一文了解 PD-L1 最新进展

来，我们将通过详细解读一线肿瘤免疫学家的最新发表文章中研究进展，结合多标记免疫荧光染色，多光谱成像和定量分析系统，为您深度解析 PD-L1 在肿瘤微环境中的表达谱，及其在胃癌 & 肝癌治疗中的研究意义及临床应用价值。郑利民教授团队将 453 个肝癌病人的活检样品，制作成肿瘤组织芯片（Tissue Microarray, TMA），并使用多标记酪胺信号放大 （Tyramide Signal Amplication, TSA）技术，对肿瘤组织芯片中的 PD-L1 和 6 种免疫细胞标志物 CD68 /CD33/CD