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- 2025年12月30日
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伊莱博生物科技（上海）有限公司
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大鼠肺纤维化模型
大鼠肺纤维化模型的制备方法及实验流程
1. 模型制备方法
1.1 单剂量博莱霉素（Bleomycin, BLM）诱导模型
博莱霉素是一种广泛使用的肺纤维化诱导剂，通过气管内注射博莱霉素可以诱导大鼠肺纤维化。
动物选择：成年雄性Sprague-Dawley大鼠。
造模方法：博莱霉素（5 mg/kg体重）通过气管内注射给药。
模型特点：在给药后第14天，模型组大鼠显示出显著的肺纤维化，表现为胶原密度增加、Ashcroft改良评分升高。
1.2 博莱霉素联合脂多糖（LPS）诱导模型
博莱霉素联合脂多糖（LPS）可以诱导急性加重的特发性肺纤维化（AE-IPF）模型。
造模方法：在博莱霉素气管内注射后的第7天，通过腹腔注射LPS（7.5 mg/kg体重）。
模型特点：在博莱霉素和LPS联合诱导后第8天，组织学分析显示炎症细胞浸润、水肿和透明膜形成。在第14天，模型组大鼠显示出更严重的肺纤维化和更低的氧饱和度。
1.3 重复剂量博莱霉素诱导模型
重复剂量博莱霉素可以诱导更严重的肺纤维化。
造模方法：首先通过气管内注射博莱霉素（4 mg/kg）诱导肺纤维化，然后在第21天给予第二次相同剂量的博莱霉素。
模型特点：在第35天，模型组大鼠的死亡率和支气管肺泡灌洗液中的IL-6水平显著高于单剂量组。
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文献和实验肺纤维化模型简介： 博莱霉素是具有多种抗肿瘤作用的多组分复合抗生素，其毒副作用之一是引起肺纤维化。由于病理组织学改变与人类肺纤维化最为接近，故被广泛用于诱导肺纤维化模型。 气管内给药是最为常用的给药途径，方法是是BLM进入动物气管后立即通过直立旋转等手段，使药物均匀分布于肺组织，导致肺部病变发生PF。气管给药可以是一次性的，也可以是重复多次的。其中使药物进入动物气管内有三种方法：1.直接支气管插管，然后滴入BLM。2.麻醉动物动物，手术剖开颈部
大鼠麻醉后，背部脱毛，于 T9-T11 胸椎区域消毒，划约 2-3cm 纵行切口，咬除椎板，暴露硬脊膜，将大鼠固定于多功能鼠固定台，应用脊髓打击器撞击骨髓（打击高度 12mm，重量 10g）大鼠出现尾部痉挛性摆动，表明造模成功。造模后，对各组大鼠进行脊髓损伤的行为学评分，利用斜板实验评测动物脊髓损伤后神经功能恢复情况，分析在脊髓损伤不同时期的变化规律。
麻醉好的大鼠绑定在多功能脑立体定位仪上，沿正中线切开头部皮肤，暴露出骨膜，轻轻切开骨膜。纯双氧水擦拭骨面，以前囟为准，采用两点注射：右侧黑质致密部(SNc)、中脑腹侧被盖区(VTA)。 SNc：前囟后(5.0)毫米, 矢状缝右侧(1.5)毫米, 硬脑膜下(7.8)毫米； VTA：前囟后(4.6)毫米, 中线右侧(0.9)毫米, 硬脑膜下(7.3)毫米。 用牙科钻钻开颅骨，用5μL微量进样器将药物注入右侧纹状体(速度为1.0 mm/min)，每孔4μL，注射速度为1μL/min，注射完毕后留针
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