肺纤维化模型

• 肺纤维化动物模型：肺纤维化（ pulmonary fibrosis，PF）是一种间质性肺疾病，以巨噬细胞、淋巴细胞等炎症细胞在肺间质浸润、纤维母细胞增生及纤维结缔组织沉积于肺间质致使出现弥散性肺泡炎和肺泡结构紊乱，并最终导致肺间质纤维化为特征，是一系列慢性肺部疾病的最终结局

肺纤维化动物模型基因相关方法致肺纤维化模型

转基因方法包括细胞因子过表达法、靶向Ⅱ型肺泡上皮细胞损伤法。

1SD大鼠细胞因子过表达法致肺纤维化模型步骤

前期准备：AdTGF-β1223/225 及腺病毒空载体 -70℃保存，临用前经病毒稀释液稀释成 1×109pfu（病毒稀释液由三种溶液构成，其配制方法：A 液：NaCl 8 g，KCl 0.2 g，Na2HPO4 1.15 g，KH2PO4 0.2 g，加双蒸水定容至100 mL，高压消毒；B 液：CaCl2·2H2O 0.1 g 定容至 10 mL，高压消毒；C 液：MgCl2·6H2O 0.1 g 定容至 10 mL，高压消毒。用前取 98 mL A 液、1 mL B 液、1 mL C 液混合备用。

操作步骤：选用 SD 大鼠，体质量（250±15） g，腹腔注射速眠新麻醉（0.4 mL·kg-1），无菌操作，剪开颈部皮肤，钝性分离颈部肌肉，充分暴露气管，经喉头下一次性注入 0.4 mL AdTGF-β1223/225 腺病毒液，手术 6 h 后观察并记录动物生理反应。

模型验证：分别与造模后 d 7、d 14、d 21，麻醉后开胸，左心室插管，先灌流温热（室温）生理盐水，剪开右心耳放血，待流出液变澄清后再缓慢灌流 4% 多聚jia醛水溶液（200 mL·30 min-1）。小心摘取整个肺和心，经气管恒压（2 452 Pa）灌注 4% 多聚jia醛固定液 10 min，使肺泡恢复扩张状态。沿纵轴切取肺组织浸入 4% 多聚jia醛固定液中固定 24 h，做常规石蜡包埋、石蜡切片、HE 染色和 Mallory 染色，光镜观察、摄片。