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伊莱博生物科技(上海)有限公司
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大鼠主动脉弓缩窄模型
大鼠主动脉弓缩窄模型(TAC)的制备方法及实验流程
1. 模型制备方法
1.1 实验动物选择
动物选择:通常选择成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠。
适应性饲养:适应性饲养1周,自由进食饮水。
1.2 麻醉与术前准备
麻醉:使用异氟烷麻醉,诱导浓度5%,维持浓度2%。
气管插管:经喉气管插管与小动物呼吸机连接,调整呼吸机呼吸频率、呼吸比与潮气量。
体温维持:术前、术后注意维持实验动物体温(恒温垫控制温度37℃)。
1.3 手术操作
皮肤切开:颈部至前胸手术区域常规备皮,碘伏消毒术区。颈、胸部正中开胸,钝性分离肌肉,撑开器撑开切口。
暴露主动脉弓:剥离胸腺,暴露主动脉弓及分支。
主动脉弓缩窄:在右无名动脉与左颈总动脉之间穿线,平行于主动脉弓上方放置缩窄用的针头(如27G或28G),打结后将线扎紧,缓缓抽出用于缩窄的针头。
关闭胸腔:关闭胸腔,缝合颈部和胸部的皮肤,碘伏消毒。
术后护理:继续通气15分钟,待大鼠恢复自主呼吸后,解除呼吸机供气。术后连续3天肌肉注射青霉素杀菌抗感染。
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文献和实验钝性分离胸腺暴露主动脉弓及分支,把主动脉弓、头臂干及左颈总动脉之间筋膜撕开小口,用穿线器穿线。结扎缩窄主动脉弓,其原理是将升主动脉或腹主动脉与24留置针头捆绑在一起造成主动脉狭窄。主动脉弓缩窄是一个慢性心室肥大的最为常用疾病模型,可用于模拟高血压或室内压增高而引起的肥厚性心肌病。此类方法制作心衰模型对技术要求比较高,操作时应当注意,不要破坏动脉血管,容易引起大出血导致造模失败。
大鼠麻醉后,背部脱毛,于 T9-T11 胸椎区域消毒,划约 2-3cm 纵行切口,咬除椎板,暴露硬脊膜,将大鼠固定于多功能鼠固定台,应用脊髓打击器撞击骨髓(打击高度 12mm,重量 10g)大鼠出现尾部痉挛性摆动,表明造模成功。造模后,对各组大鼠进行脊髓损伤的行为学评分,利用斜板实验评测动物脊髓损伤后神经功能恢复情况,分析在脊髓损伤不同时期的变化规律。
麻醉好的大鼠绑定在多功能脑立体定位仪上,沿正中线切开头部皮肤,暴露出骨膜,轻轻切开骨膜。纯双氧水擦拭骨面,以前囟为准,采用两点注射:右侧黑质致密部(SNc)、中脑腹侧被盖区(VTA)。 SNc:前囟后(5.0)毫米, 矢状缝右侧(1.5)毫米, 硬脑膜下(7.8)毫米; VTA:前囟后(4.6)毫米, 中线右侧(0.9)毫米, 硬脑膜下(7.3)毫米。 用牙科钻钻开颅骨,用5μL微量进样器将药物注入右侧纹状体(速度为1.0 mm/min),每孔4μL,注射速度为1μL/min,注射完毕后留针
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