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- 详细信息
- 文献和实验
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现货库存
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南京万木春
- 规格:
1×10^6cells/T25或1mL冻存管
人(Human)磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA检测试剂盒
检测原理
试剂盒采用双抗一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data 期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16 作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1 DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
可能与其他物种发生交叉反应, 除非特异性的经过交叉反应物种的吸附处理。在抗体描述中,经过其他物种的吸附处理的抗体标有“ (min X …Sr Prot) ”字样 。 Anti-IgG (H+L) 这类抗体和 IgG 分子的重链和轻链都可以反应,比如,和 IgG 分子的 Fc , F(ab ’)2/Fab 部分。 Anti-IgG (H+L) 抗体也可以和其他的免疫球蛋白家族( IgM , IgA ,IgD,IgE )和亚家族反应,因为所有的免疫球蛋白都有相同的轻链(或者 κ 链
。 详细操作步骤,样品处理,请仔细阅读试剂盒说明书,讲解的很清楚。 yys700714 谢谢您了!!还有,请问:除了买这个试剂盒之外,什么试剂都不需要准备了么?比如,PI3-K P85α抗体及磷脂酰肌醇。这个方法与用放射标记后TLC分析的PI3-K活性有区别么?看您介绍的似乎是一样的吧,对了,用PI3-K ELISA试剂盒测的话需要什么仪器么?不好意思,麻烦您了。感觉您说的很好,应该很有经验的,得到您的答复觉得心里更有底啊。再次感谢!!
固相和制备酶结合物。但在HBsAg的检测中应注意亚型问题,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4个亚型,显然每种亚型均有相同的a决定簇的反应性,这也是用单抗作夹心法应注意的问题。双抗体夹心法测抗原的另一注意点是类风湿因子(RF)的干扰。RF是一种自身抗体,多为IgM型,能和多种动物IgG的Fc段结合。用作双抗体夹心法检测的血清标本中如含有RF,它可充当抗原成份,同时与固相抗体和酶标抗体结合,表现出假阳性反应。采用F(ab')或Fab片段作酶结合物的试剂,由于去除了Fc段,从而可消除RF的干扰
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