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        【求助】如何用免疫沉淀法测定PI3K活性?

        丁香园论坛

        2873

        请问如何用免疫沉淀法测PI3K活性呢?我查到相关文献,写得很清楚的,不过还是不太懂,不知需要准备什么试剂,需要什么仪器测定,TLC是什么啊,是不是需要荧光图像仪?很多疑问,请求做过的高手给予指点。多谢!!
        建议可以使用Echelon的PI3-K ELISA试剂盒。
        http://www.echelon-inc.com/ccp1231-pi3-k-elisa-kit-k-1000.htm
        原理参见试剂盒说明书。
        谢谢,这个是测定活性的么?好做么?对样本要求如何?能否将您的体会详细告之。我是新手,不懂的好多。非常感谢!!
        用这个试剂盒可以通过体外实验检测PI3-kinase的活性。
        原理是首先利用免疫沉淀法得到PI3K复合物,然后用PI3K体外催化PIP2为PIP3,最后使用ELISA检测PIP3的水平,进而反映PI3-kinase的活性。
        详细操作步骤,样品处理,请仔细阅读试剂盒说明书,讲解的很清楚。
        谢谢您了!!还有,请问:除了买这个试剂盒之外,什么试剂都不需要准备了么?比如,PI3-K P85α抗体及磷脂酰肌醇。这个方法与用放射标记后TLC分析的PI3-K活性有区别么?看您介绍的似乎是一样的吧,对了,用PI3-K ELISA试剂盒测的话需要什么仪器么?不好意思,麻烦您了。感觉您说的很好,应该很有经验的,得到您的答复觉得心里更有底啊。再次感谢!!
        请仔细阅读试剂盒说明书,讲解的很清楚。

        本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴

        师兄微信号:shixiongcoming

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