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基因过表达载体构建服务(慢病毒/转座子/瞬时/其他特殊需求的

载体构建)
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  • ¥1000
  • 艾迪基因基于成熟经验,构建稳定过表达载体高效整合
  • 广州
  • 2025年10月16日
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      艾迪基因

    • 服务名称

      基因过表达载体构建服务

    • 规格

    基因过表达载体构建
    基因过表达,是将目标基因递送到宿主细胞中,使该基因过量表达。基因过表达广泛用于基因功能研究、疾病模型构建、药物筛选、蛋白质生产以及基因治疗等方向。
     
    服务详情
    艾迪基因基于多年的细胞生物学经验,建立了一套成熟的基因过表达载体构建实验体系。可以提供稳定过表达载体或瞬时过表达载体等构建服务。我们可采用慢病毒转导方法,将不超过5 kb的外源基因高效整合到宿主细胞基因组中,并在多次传代后仍保持稳定的表达效果。此外,我们还可应用转座子方法,实现超过5 kb目的基因在细胞内的长期稳定表达。
    服务类型 慢病毒稳定过表达载体构建/转座子稳定过表达载体构建/瞬时过表达载体构建/其他特殊需求的载体构建
    交付标准 1.质粒图谱
    2.质粒测序结果
    3.质粒扩增操作说明
    4.质粒
    周期 快至2周
    价格 1000元起 ;具体可来电咨询18102225074
     
    服务优势
    产品细节图片1
     
    服务类型
    可根据客户需求,综合基因等情况,进行基因过表达载体的设计和构建。
    1. 慢病毒稳定过表达载体构建
    2. 转座子稳定过表达载体构建
    3. 瞬时过表达载体构建
    4. 其他特殊需求的载体构建
     
    质粒图谱
    产品细节图片2
     
    Lenti 过表达慢病毒质粒图谱
     
    产品细节图片3
    pPB 过表达转座子质粒图谱
     
     
    FAQ
    1、如何选择合适的载体类型?
    选择载体时,应考虑实验的目的和宿主细胞的类型。例如,质粒载体常用于细菌中基因的表达或扩增,病毒载体则更适合用于哺乳动物细胞中的基因转导。除此之外,载体的启动子、复制子以及抗生素选择标记也需要根据具体需求进行选择。
     
    2、艾迪基因载体构建的宿主菌是什么?顾客可以使用什么类型菌株来扩增质粒载体?
    载体在进行扩增时,通常会使用大肠杆菌(E. coli)菌株来进行。在实验操作中,常用的大肠杆菌菌株是DH5α。DH5α适用于大多数非重组型载体。对于重组型载体,如慢病毒载体和转座子载体等,可以使用Stbl3菌株进行扩增。Stbl3是一种特殊的大肠杆菌(E. coli)菌株,来源于,HB101 E. coli strain,其基因组含有重组酶recA13突变,这可以有效地抑制长片段末端重复区的重组,从而降低错误重组的概率。
     

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献
    参考文献
    1. SKOV3 和 OVCA420 细胞系中过表达lnc-CTSLP8
    The lnc-CTSLP8 upregulates CTSL1 as a competitive endogenous RNA and promotes ovarian cancer metastasis
    卵巢癌具有高度致死性且预后不良,其原因是转移。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤发展中起关键作用,但在卵巢癌转移中的作用尚不明确。研究者通过公共数据库(TCGA和GEO)分析并通过qRT-PCR验证lnc-CTSLP8在卵巢癌中的表达。利用慢病毒载体和CRISPR/Cas9系统构建lnc-CTSLP8过表达和敲除细胞系,分析细胞增殖、迁移和侵袭。在体内研究中,使用卵巢原位肿瘤小鼠模型,观察细胞中的自噬和EMT标志物,并通过RNA免疫沉淀和双荧光素酶报告基因实验确认lnc-CTSLP8与miR-199a-5p的相互作用。结果发现lnc-CTSLP8在转移性卵巢癌中高表达,过表达促进卵巢癌的发展并增强自噬和EMT。机制上,lnc-CTSLP8作为竞争性内源RNA上调CTSL1并表现出致癌效应。CTSL1抑制剂和miR-199a-5p过表达消除了lnc-CTSLP8过表达的效果。研究表明lnc-CTSLP8作为ceRNA在卵巢癌中起作用,是潜在的治疗靶点。
    相关实验
    • 非编码RNA研究及实验

      一 miRNA成熟及作用方式(Mikhailidis DP, Athyros VG. Nat Rev Cardiol. 2014 Feb;11(2):72-4.) miRNA过表达:将miRNA前体序列构建入病毒载体中,该载体既可用于瞬时转染细胞,也可以包装成病毒用于稳定株筛选和动物水平过表达miRNA。 miRNA敲低:设计针对miRNA的TuD RNA封闭片段或海绵片段,再将该片段构建入病毒载体中。该载体除了可以直接瞬时转染细胞用于miRNA的敲低,也可以包装成慢病毒,用于动物水平敲低miRNA

    • 线粒体和凋亡

      同时,Apaf―1可以激活原形的caspase―9,形成细胞色素C/Apaf―1/caspase―9复合体,即凋亡复合体(apoptosome)。该复合体水解并激活下游的caspase通路如caspase―3等。     凋亡复合体的形成是凋亡信号启动的关键步骤。目前发现激活的癌基因可以辅助凋亡复合体的形成,比如腺病毒EIA可以上调Apaf―1和caspase―9,E2F1可以上调Apaf―1的表达。Apaf―1的释放可促进凋亡复合体的形成,对凋亡的启动起促进作用。目前的研究认为,细胞

    • 【共享】【申请加分】国外癌症基础研究的主要进展

      删除突变的drs基因分析揭示,C末端区以及3个一致重复的N末端区都出现凋亡。Caspase-12、Caspase –9以及Caspase-3都继续被drs激活,Caspase--3,和Caspase-9的抑制剂都抑制drs引起的凋亡。在凋亡过程中没有看到因drs引起线粒体细胞色素C释放到细胞质去,这表明线粒体途径不是drs介导的凋亡,而且,研究人员发现,Drs蛋白能与定位在内质网的凋亡蛋白ASY/Nogo-B/RTN-x(S)结合,并且这些基因共同表达增加了凋亡的效果。这项研究结果提示,由ASY

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