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- 2025年12月08日
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欣百诺在分子生物学实验及重组蛋白制备方面都有着丰富的经验，以重组蛋白制备为核心，为客户提供可靠的分子生物学技术服务，主要包括：基因合成、基因克隆、载体构建、定点突变（单点及多点突变）、DNA操作（片段缺失及拼接等）及质粒大量制备。
·基因克隆、载体构建——步骤 1. 表达系统选择及方案设计（此项服务免费）
根据客户所需的要求，推荐最适合的表达系统（大肠杆菌/酵母/昆虫细胞/哺乳动物细胞表达系统）。
根据客户选择的表达系统，推荐密码子优化方案。
设计最佳的表达载体构建（是否融合表达、是否添加Tag等）及相应的蛋白纯化方案
提供客户：各种建议方案
时间：1~3工作日
·基因克隆、载体构建——步骤2. 获取目标基因DNA序列
从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。
根据选定的表达系统对cDNA进行密码子优化。
合成设计好的基因序列或通过基因克隆的方式获得基因序列。
提供客户：目标基因（在T载体或常规克隆载体上）及测序报告
时间： 2~3周
·基因克隆、载体构建——步骤3. 表达载体构建
选定的标签序列/Tag （可选用的Tag见下表）按同一读码框融合于标基因的5’，3’端（亦可融合在基因编码序列中，融合位置需专门设计），也可利用载体上自带的标签序列而无需另外添加。
·基因克隆、载体构建——步骤 1. 表达系统选择及方案设计（此项服务免费）
根据客户所需的要求，推荐最适合的表达系统（大肠杆菌/酵母/昆虫细胞/哺乳动物细胞表达系统）。
根据客户选择的表达系统，推荐密码子优化方案。
设计最佳的表达载体构建（是否融合表达、是否添加Tag等）及相应的蛋白纯化方案
提供客户：各种建议方案
时间：1~3工作日
·基因克隆、载体构建——步骤2. 获取目标基因DNA序列
从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。
根据选定的表达系统对cDNA进行密码子优化。
合成设计好的基因序列或通过基因克隆的方式获得基因序列。
提供客户：目标基因（在T载体或常规克隆载体上）及测序报告
时间： 2~3周
·基因克隆、载体构建——步骤3. 表达载体构建
选定的标签序列/Tag （可选用的Tag见下表）按同一读码框融合于标基因的5’，3’端（亦可融合在基因编码序列中，融合位置需专门设计），也可利用载体上自带的标签序列而无需另外添加。
测序验证构建质粒的准确性。 可提供的表达载体（若需特殊的表达载体或启动子序列，需由客户提供）：
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| 提供客户：正确构建的重组表达质粒，含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 时间：1周 ·基因克隆、载体构建——步骤4. 质粒大规模柱纯化服务 我们采用国外进口的DNA纯化填料，通过柱纯化方式纯化提取质粒，可为客户提供高纯度质粒，并可根据需求进行去内毒素处理。可对质粒进行大规模柱纯化，提供客户1mg至克级以上的纯化质粒。 提供客户：纯化质粒，对于要求去内毒素的质粒提供鲎试剂检测报告。 时间：1周 |
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文献和实验相关实验
方法还是占主要地位，尤其是新兴的方法如果要做 gain-of-function 仍然逃避不了克隆 gene 片段这个步骤，打好相关的基础，掌握其中原理才能在各种 tools 出现时及时掌握并灵活应用。接下来讲述基因克隆的流程1 首先获得某基因的序列在 pubmed 主页下拉框选定 Gene 或者 Nucleotide，然后在输入框输入基因名称如 Znf516 点击 search 后，进入（如图 1）。在左边分类 Sequence content 里选择 CCDS（如图 2），在右侧选择种属 Mus
1、载体基本介绍 2、载体分类及应用 3、载体构建及应用注意事项
基因(gene)是遗传物质的最基本单位，也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能，还是要改变某个基因的功能，都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1 根据已知序列克隆基因 对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最为简便的一种。获取基因序列多从文献中查取，即将别人报道的基因序列直接作为自己克隆的依据。现在国际上公开发行的杂志一般都不登载整个基因序列，而要求作者在投稿之前将文章中所涉及的基因序列在基因库中注册
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