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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
艾迪基因
- 服务名称:
CRISPR检测服务
- 规格:
套
▍CRISPR检测服务
艾迪基因基于CRISPR检测开发的高灵敏度、高特异性、快速恒温核酸检测技术——FASST快速检测技术,解决了传统CRISPR检测中存在的问题,如操作复杂、易污染、灵敏度低和耗时长。通过自主开发的蛋白质纯化平台优化Cas酶结构,开发特有的crRNA设计逻辑,生产高效crRNA,并使用自主设计的reporter,实现更高灵敏检测,简化操作步骤,减少污染风险。可根据您的实验需求选择:分步定制或全套定制检测服务。
▍服务详情
| 服务内容 | 服务说明 | 交付标准 |
|---|---|---|
| 制备靶标基因模板 | 合成靶标质粒 | 靶标质粒 |
| crRNA和RPA恒温扩增引物的设计与合成 | 根据靶标序列设计crRNA和RPA引物 | crRNA,2 OD |
| RPA恒温扩增引物的活性筛选 | 多对RPA引物分别扩增靶标序列,确认效率好的引物对 | RPA恒温扩增引物,2 OD |
| crRNA的活性筛选 | 多条crRNA进行活性分析,确认效率好的crRNA | 结题报告与原始数据 |
| crRNA和RPA恒温扩增引物的实验体系建立和优化 | 对RPA引物对和crRNA的最佳组合进行灵敏度测试、特异性测试和准确性测试 | 结题报告与原始数据 |
| FASST检测整套服务 | / | 结题报告,50个反应的试剂CRISPR配套试剂盒 |
▍FASST快速检测平台

原理图
▍技术优势

▍技术对比
| 项 目 | FASST | PCR | LAMP等恒温扩增 | 传统CRISPR检测 |
|---|---|---|---|---|
| 反应温度 | 37-42℃ 恒温 | 95℃-55℃-72℃ 变温 | 65℃ 恒温 | 37-42℃ 恒温 |
| 运行时间 | 5-20 mins | 1-2h | 40-60mins | 30-60 mins |
| 引物数量 | 2条 | 2条 | 4-6条 | 2条 |
| 试剂状态 | 液体/冻干 | 液体 | 液体 | 液体/冻干 |
| 设备要求 | 恒温设备(金属浴,水浴等) | PCR扩增仪 | 恒温设备 | 恒温设备(金属浴,水浴等) |
| 操作性 | 操作极为简单可实现 真正意义上的便携 | 专业操作要求,高设备操作复杂 | 操作简单 | 操作极为简单 可实现真正意义上的便携 |
| 气溶胶污染 | 单管反应,污染风险低 | 存在气溶胶污染风险 | 存在气溶胶污染风险 | 两管反应,存在气溶胶污染风险 |
▍实验流程

▍CRISPR检测相关产品
● Cas酶
艾迪基因提供高纯度、高活性的 Cas 酶,其灵敏度和活性均处于行业领先水平。

● crRNA

● DNA恒温扩增试剂盒
DNA恒温快速扩增试剂盒是基于一种常温恒温核酸快速扩增技术开发的试剂盒,适用于实验室级别的DNA扩增以及其他检测用途的DNA扩增使用。具有灵敏度高、特异性强、反应时间短等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。使用金属浴、水浴锅等即可进行反应操作,无需购买PCR仪等价格高昂的设备。

● RNA恒温扩增试剂盒
RNA恒温快速扩增试剂盒是基于一种恒温核酸快速扩增技术开发的试剂盒,适用于实验室级别的RNA扩增以及其他检测用途的RNA扩增使用。具有灵敏度高、特异性强、反应时间短(仅需30 min)等优点,反应组分为干粉状态,操作简便,易于保存。使用金属浴、水浴锅等即可进行反应操作,无需购买PCR仪等价格高昂的设备。

● 试纸条

● 探针

● T7体外转录试剂盒

● RNase 抑制剂

▍应用案例



▍FAQ
2)选择合适的信号报告底物。有关研究指出,使用15 nt的单链DNA(ssDNA)作为报告底物时,Cas12a的切割反应速率达到最大值,相较于常用的5-nt ssDNA,反应速率显著提升。
3)优化反应条件和缓冲液。通过优化CRISPR反应的条件如Cas酶与crRNA比例、Cas酶使用浓度、反应温度等可以在一定程度上提高检测效果。
1)明确目的基因序列。
2)明确使用的Cas蛋白。不同的Cas蛋白,需要识别相应的PAM(Protospacer Adjacent Motif)序列,例如Cas12a需要依靠“TTTV”PAM序列进行靶标识别。
3)选择crRNA靶向区域。在目标基因上选择一个20nt核苷酸序列,该序列紧邻PAM位点,且与crRNA的互补链配对。
4)选定的20nt靶向区域作为 target sequence(可变部分)加上scaffold sequence (固定部分)以设计crRNA序列。
5)使用在线工具如CRISPR design tool(例如CRISPOR、 Benchling等)来帮助设计crRNA。这些工具可以预测sgRNA的效率和特异性,避免可能的脱靶效应。
6)设计完成后,可以通过合成生物学公司订购合成的crRNA序列。
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文献和实验▍客户文献
1、PAIT effect: Padlock activator inhibits the trans-cleavage activity of CRISPR/Cas12a
2、Optimization of CRISPR/Cas12a detection assay and its application in the detection of Echinococcus granulosus
3、A Rapid RPA-CRISPR/Cas12a Detection Method for Adulteration of Goat Milk Powder
4、Targeted Macrophage CRISPR-Cas13 mRNA Editing in Immunotherapy for Tendon Injury
5、PAIT effect: Padlock activator inhibits the trans-cleavage activity of CRISPR/Cas12a
6、Dumbbell probe initiated multi-rolling circle amplification assisted CRISPR/Cas12a for highly sensit
7、A super convenient and specific CRISPR/Cas12a diagnostic platform for toxigenic Burkholderia gladiol
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