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文献和实验zhangyuxianggx 各位大侠好！现有pcDNA3-mCherry和pGEM-hgene两个东西在滤纸上，老师就说让构建载体，具体是什么意思啊？我理解的是一个真核表达载体和构建好的pGEM质粒，但是不知下一步该怎么做？恳请各位好心的大侠指点一二。 shylook 直接插入cDNA吧 zhangyuxianggx 那个pGEM就是已经插入了DNA的载体。请问这两个东西溶下来以后
报告基因 怎么选 EGFP 还是荧光素酶？成像和定量根本不是一回事
，GFP 就拼回来发光，等于肉眼见证蛋白互作。 拆分 GFP 在病毒工具里也实用：比如把 GFP1-10 稳定表达在细胞里，病毒只带一小段 GFP11 融合，能显著减小载体装载负担。相关标准序列可参考 Addgene 的 78590、193867。 怎么选更合理 一句话：看设备、看目的。做共聚焦看蛋白去了哪个细胞器、做活细胞长时间追踪，闭眼选 EGFP/mCherry 这类荧光蛋白，红绿搭配还能多标。做启动子活性比较、做药物筛选看信号涨落、做小鼠体内肿瘤负荷监测，选荧光素酶，灵敏度高、背景干净
Neuroscience. (IF=19.912). Yao J,et.al. (2018). A corticopontine circuit for initiation of urination. [腺相关病毒, 神经环路] 注射部位：小鼠皮层M1、PMC载体：rAAV2/1-hSyn-Cre&rAAV2/9-DIO-hChR2(H134R)-mCherry、rAAV2/9-DIO-GCaMP6s病毒滴度：rAAV2/1: 5 × 1012 VG/mL；rAAV2/9-DIO-hChR2：1.2 × 1013
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