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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
三磷酸胶瞽酶钙―钴法 三磷酸腺苷酶 可水解磷酸与磷酸之间的高能键,而释放大量能量,而磷酸酶是酯酶 ,能水解磷酸与碳酸之间的键。反应式如下: A--P~P~P+H2 O ATPase A―P―P+ H3 PO4 +能量 在生物膜上,ATP酶的功能是参与离子泵的主动运输,因此细胞膜呈强阳性,ATP酶可作为肝细胞早期受损的敏感指标。此酶活性在心肌最高,其次为骨骼肌、肺、肾脏、脑和胰腺。由于各种ATP酶的最适pH值不同,故所用显示方法也不同。下面仅
碱性磷酸酶钙―钴法 磷酸酶(phosphatase)是水解磷酸酯酶的总称。磷酸酶不仅参与磷酸酯化合物的水解反应。而且也参与其逆反应及磷酸转移反应。1.碱性磷酸酶 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)在碱性环境下可催化各种酚和醇的磷酸酯水解,还具有磷酸转移作用,在细胞膜上运输作用较为活跃,如肾近端小管的刷状缘、小肠上皮的微绒毛、肝脏的胆小管、毛细血管内皮细胞及神经元的突触膜均可显示此酶活性。在碱性环境(;pH 9.2~9.4)中,碱性磷酸酶将磷酸盐的底物(如β-甘油
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