- ￥100 - 1000
- 2025年07月12日
企业认证
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
免疫荧光五标六色扫描全套（芯片）
服务介绍：
免疫荧光五标即利用酪胺信号放大（TSA，Tyramide signal amplification）即TSA技术，在同一张切片上对五种蛋白同时进行标记，从而可实现对多种蛋白空间定位，定性及半定量分析。
TSA技术主要原理为荧光标记的酪胺在二抗上偶联的HRP与H2O2的作用下变为活化的酪胺并附着在靶标周围的蛋白酪-氨酸残基上，此结合是共价结合。而一抗与靶标、二抗与一抗之间是非共价结合。通过微波处理，非共价结合的一抗二抗被打断并洗脱掉，而共价结合的荧光酪胺依然附着在靶标周围，将靶标通过荧光标记显示出来。在检测第二个靶标时，相当于全新的一轮标记，无需考虑第二轮的抗体是否与第一轮的抗体产生交叉反应。只需改变不同种类荧光染料标记TSA即可实现多个靶标的标记。通过多次重复免疫标记，使用不同的荧光酪胺实现双重或多重荧光染色。
|
名称 |
规格 |
|
免疫荧光五标六色扫描全套（芯片） （包含免疫荧光染色和扫描） |
张 |
送样运输要求：
1、组织样本放置于10倍样本体积的通用型组织固定液中固定24h以上，常温保存运输石蜡包埋切片。切勿冷冻结冰，切勿固定时间过长。
2、石蜡切片常温保存运输。
3、荧光四标只能做石蜡包埋切片，不能做冰冻切片和细胞爬片。
实验大体流程：
石蜡切片脱蜡至水——微波抗原修复——画圈双-氧水封闭——血清封闭——孵育第一种一抗——孵育HRP二抗——孵育iF440-TSA——微波处理——血清封闭——孵育第二种一抗——孵育HRP二抗——孵育iF488-TSA——微波处理——血清封闭——孵育第三种一抗——孵育HRP二抗——孵育iF546-TSA——微波处理——血清封闭——孵育第四种一抗——孵育HRP二抗——孵育iF594-TSA——微波处理——血清封闭——孵育第五种一抗——孵育HRP二抗——孵育iF700-TSA——DAPI染核——自发荧光淬灭——抗荧光淬灭封片剂封片——扫描全景成像。
实验具体流程：
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将石蜡切片放入环保型脱蜡液I 10min-环保型脱蜡液II 10min-环保型脱蜡液III 10min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-无水乙醇Ⅲ 5min-蒸馏水洗。
2、抗原修复：组织切片置于盛满抗原修复缓冲液（PH 6.0 柠檬酸；PH 9.0 EDTA； PH 8.0 EDTA）的抗原修复盒中于微波炉内进行抗原修复。维持缓冲液沸腾10min左右，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min(修复液种类和修复条件根据组织来确定）。
3、画圈, 双-氧水封闭：切片稍甩干后用免疫组化笔在组织周围画圈（防止试剂流走），切片平放于避光湿盒滴加3%双-氧水溶液，室温避光孵育25 min左右，封闭内源性过氧化物酶。将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
4、血清封闭:切片平放于透明湿盒滴加血清室温封闭30min。一抗是山羊来源用10%兔血清封闭，一抗其它来源的用3%BSA封闭。
5、加第一种一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加用无菌PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于透明湿盒内4°C孵育过夜（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）。
6、加对应种属HRP标记二抗：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后平放于透明湿盒在圈内滴加与一抗相应种属的HRP标记的二抗覆盖组织，室温孵育50min。
7、加iF440-TSA：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加iF440-TSA，避光室温孵育10min。 孵育完后，将玻片置于TBST中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
8、微波处理：组织切片置于盛满PH 6.0 柠檬酸修复液的修复盒中于微波炉内加热处理维持沸腾10min左右去掉已经结合到组织上的一抗二抗，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。
9、血清封闭:切片平放于透明湿盒滴加血清室温封闭30min。一抗是山羊来源用10%兔血清封闭，一抗其它来源的用3%BSA封闭。
10、加第二种一抗：在切片上滴加用无菌PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于避光湿盒内4°C孵育过夜（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）。
11、加对应种属HRP标记二抗：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的HRP标记的二抗覆盖组织，室温孵育50min。
12、加iF488-TSA：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加iF488-TSA，避光室温孵育10min。 孵育完后，将玻片置于TBST中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
13、微波处理：组织切片置于盛满PH 6.0 柠檬酸修复液的修复盒中于微波炉内加热处理维持沸腾10min左右去掉已经结合到组织上的一抗二抗，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。
14、血清封闭:切片平放于透明湿盒滴加血清室温封闭30min。一抗是山羊来源用10%兔血清封闭，一抗其它来源的用3%BSA封闭。
15、加第三种一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加用无菌PBS（按一定比例配好的一抗，切片平放于避光湿盒内4°C孵育过夜（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）。
16、对应的HRP标记的二抗：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加与一抗相应种属的HRP标记的二抗覆盖组织，室温孵育50min。
17、加iF546-TSA：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加iF546-TSA，避光室温孵育10min。 孵育完后，将玻片置于TBST中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
18、微波处理：组织切片置于盛满PH 6.0 柠檬酸修复液的修复盒中于微波炉内加热处理维持沸腾10min左右去掉已经结合到组织上的一抗二抗，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。
19、血清封闭:切片平放于透明湿盒滴加血清室温封闭30min。一抗是山羊来源用10%兔血清封闭，一抗其它来源的用3%BSA封闭。
20、加第四种一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加用无菌PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于避光湿盒内4°C孵育过夜（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）。
21、对应的HRP标记的二抗：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加与一抗相应种属的HRP标记的二抗覆盖组织，室温孵育50min。
22、加iF594-TSA：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加iF594-TSA，避光室温孵育10min。 孵育完后，将玻片置于TBST中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
23、微波处理：组织切片置于盛满PH 6.0 柠檬酸修复液的修复盒中于微波炉内加热处理维持沸腾10min左右去掉已经结合到组织上的一抗二抗，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。
24、血清封闭:切片平放于透明湿盒滴加血清室温封闭30min。一抗是山羊来源用10%兔血清封闭，一抗其它来源的用3%BSA封闭。
25、加第五种一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加用无菌PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于避光湿盒内4°C孵育过夜（湿盒内加少量水防止抗体蒸发）。
26、对应的HRP标记的二抗：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加与一抗相应种属的HRP标记的二抗覆盖组织，室温孵育50min。
27、加iF700-TSA：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加iF700-TSA，避光室温孵育10min。 孵育完后，将玻片置于TBST中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
28、DAPI复染细胞核：切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min。将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
29、自发荧光淬灭：切片稍甩干后将切片平放于避光湿盒在圈内加入自发荧光淬灭剂5min，流水冲洗10min。
30、封片：将玻片置于PH7.4 PBS中在钟摆摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。
31、镜检成像：切片置于玻片数字扫描仪下扫描全景成像。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验免疫荧光五标六色扫描全套（芯片）
介于上述两者之间 功能:1.多荧光标记样品的图像采集 2.无损伤、连续光学切片，显微“CT” 3.真正的三维重组 4.假三维图的显示 5.可沿Z轴(xy平面)和Y轴(xz平面)方向进行光切 6.定量分析 7.xyt 、xzt、xyzt 和 xt 扫描―― 时间序列扫描 8.图像处理 9. 旋转扫描 10.区域扫描 11.光谱扫描 五、激光扫描共焦显微镜技术
发生结合→扫描检测→计算机识别疾病的基因 芯片的面积只有指甲盖大小(1―2平方厘米)，将其嵌在一小块黑色胶片上，在上面铺上一层肉眼看不见的DNA纤维，即DNA小探针，将需要被检测的基因提取出来后，切成长短不一的片段，用荧光化学物标记，检测时将标记过的荧光物质加在芯片上，与芯片上的大量探针进行杂交，标记过的DNA受激光光束激发后发出荧光，荧光的强弱与探针杂交程度相关。 图像分析： 用荧光显微镜装置对片基进行扫描，计算机收集荧光信号，并对每个点的荧光强度数字化后进行分析，通过特制软件对不同区域荧
应用 一、甲组溶血性链菌的快速检查法 （一）试剂制备 （二）检查方法 二、脑膜炎双球菌的快速检测法 （一）制备荧光抗体 （二）检查方法 二、脑膜炎双球菌的快速检查法 （一）制备荧光抗体 （二）检查方法 三、霍乱弧菌和副霍乱弧菌的快速检查法 四、鼠疫标菌的快速检查法 五、炭疽杆菌的快速检查法 六、致病性大肠杆菌的快速检查法 七、结核杆菌的快速诊断方法 八、其他细菌的快速检查方法 九、钩端螺旋体的检查法 十、梅毒螺旋体的检查法 （一）抗原制备 （二）荧光抗体 （三）间接免疫荧光
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
