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胼胝质染色(整染)
胼胝质是植物细胞壁中的一种重要成分,尤其在筛管周围广泛分布。苯胺蓝法利用苯胺蓝染料与胼胝质结合的特性,使胼胝质在荧光显微镜下呈现亮蓝荧光,从而实现对胼胝质的观察和定位。
服务介绍:
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名称 |
规格 |
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胼胝质染色(整染) |
张 |
实验流程:
植物叶片脱色→苯胺蓝染色→贴片封片→荧光拍照观察
送样运输要求:
1、样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2、胼胝质染色(整染)一般只适合较薄的植物样本,如叶片等,茎,较粗的根建议做成切片后再染色。
送样须知:
1.南京和上海地区的客户可提供上门取样服务,提前一天联系
2.外地客户可邮寄样本,样本运输应符合一般的生物学要求,密封加冰袋或者干冰运输
3.若细胞、血清、组织样本具有潜在的传染性或致病性,请务必提前告知
4.测试结束提供实验报告后,样本可以保留1个月,若需保留样本或者回收样本请提前告知。
备注:本公司对客户的项目的专有技术和资料(包括实验方案,测试结果,样本等)负有绝对保密的责任。
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文献和实验胼胝质染色(整染)
能和 FcγR Ⅲ/Ⅱ结合,封闭非特异性染色,使阴性细胞的背景荧光降至未标记细胞的水平。加入 0.5-1μg 纯的抗小鼠 CD16/32 单克隆抗体,室温孵育 10min。 对于人和大鼠,可直接使用过量的与荧光抗体相同来源和亚型的纯化 Ig 或者与目标种属相同来源血清进行阻断,或者用商业化的 Fc 受体阻断剂。 五、细胞表面抗体孵育 根据实验设计,除空白对照外,对应的单染管、全染管加入相应的抗体 5μL,混匀,4℃ 避光孵育 30min。 六、固定破膜 按照说明书稀释固定破膜液。 每管加入
蛋白分子 以 CD45+白细胞样本为例,在排除了死细胞和粘连体后,未进行染色、也未进行 Fc 受体阻断的空白样本,各通道荧光处于低水平。如图所示: 染同型对照后,背景荧光增强。 针对这种因 FcR 导致的强背景,建议可以添加 FcR 封闭剂,如下图所示: 阻断 FcR 后,染同型对照,背景荧光恢复到与空白相似。 #03 什么时候需要做同型对照? (1)对于阴阳性分群明显的指标,不需要同型对照即可设门,例如 CD3、CD4、CD8 等用于 T 细胞的检测指标。对于阴阳性分群不清楚的指标,例如 CD25、CD
人外周血单细胞悬液制备流程 1.采集人外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入100 μL新鲜血和2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃裂解10 min。 300 g离心5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清,得到白色细胞沉淀。 PBS洗涤一次。 加入100 μL细胞染色缓冲液重悬细胞,不用计数,即可进行后续流式抗体染色实验。按照100 μL新鲜血样本制备的单细胞悬液,加入1 Test对应的流式抗体混匀进行后续实验。 注意事项: 1. 采血用抗凝管,有肝素和EDTA两种
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