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- 2025年07月15日
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服务介绍：
外泌体(exosome)：是细胞主动向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡样小体，该囊泡可携带多种蛋白质、mRNA、miRNA等，参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。根据外泌体的大小和密度，用不同的离心速度，达到分离出外泌体的超速(差速)离心法，是学术上用的比较多且较认可的外泌体的提取方法，被认为是外泌体-提取的黄金方法。
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囊泡 |
大小（nm） |
密度（g/mL） |
来源 |
标记 |
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外泌体 |
40-200 |
1.13-1.18 |
内体（endosomes） |
tetraspanins, Alix, TSG101,CD4,CD9 |
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微泡 |
200-2000 |
1.16-1.19 |
质膜（plasma membrane ） |
integrins, selectins, CD40 |
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凋亡小体 |
500-2000 |
1.16-1.28 |
质膜，内质网（plasma membrane, endoplasmic reticulum） |
phosphatidylserine, genomic DNA |
Ref: Huilin Shao et al,New Technologies for Analysis of Extracellular Vesicles,Chem.Rev. 2018,118:1917-1950
外泌体应用领域：
外泌体参与不同细胞间的物质传输和信号传递;
外泌体具备一些免疫调节功能(由于有大量免疫相关分子：抗原传递分子、热休克蛋白等);
外泌体参与细胞废物的排泄和处理;
不同来源的外泌体有其特异性，存在着不一样的功能;
外泌体已广泛的被用在医学临床疾病的诊断以及相关预防研究上;
外泌体可能被当做一种药物的载体等
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名称 |
规格 |
价格（元） |
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外泌体提取 |
样 |
800 |
低速离心去除碎片-过滤-高速离心-超速离心-蛋白浓度检测
注：外泌体提取后，可另收费进行电镜负染和WB检测（tsg101，cd9，cd63三选二）
送样运输要求：
细胞上清样本：一个样本提供70ml的培养上清(细胞在含常规FBS培养基中培养一定时间，待细胞融合度约为60% - 70%时，移去原有含FBS的培养基，换成新鲜的含无外泌体血清的培养基，继续培养3天左右，细胞融合度达到80%-95%左右时，收取细胞上清），干冰运输到实验室。
血清样本：血液经普通采血管采集后室温静置30min，3000g离心15min，收集上层血清，5ml，-80℃纯干冰运输。
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文献和实验外泌体提取
细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心，3000g，15min； 3.离心后样本（有略微沉淀） 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层； 震荡混匀； 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上，离心 10000g，60min； 6.离心后的样本（沉淀明显，沉淀中富含外泌体） 将上清吸出留下沉淀，将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液； 7.加 PBS 重悬沉淀； 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
远远比常规试剂盒提取高，更好的保留外泌体的活性和形态； 大规模提取是有参考的解决方案的，这两篇文献很好的做了阐释。 关键步骤 [1]： ● 收集条件培养基（CM）：收集神经母细胞瘤 N2a 和成肌细胞 C2C12 的培养基，经过低速离心和 0.22 μm 过滤去除大颗粒和细胞碎片。 ● 处理大体积培养基：对于大体积培养基（50 ml 至 200 mL），使用切向流过滤（TFF）系统进行浓缩和透析，然后加载到结合-洗脱分子筛层析（BE-SEC）柱上进行纯化。 ● 分离 EVs：根据 280 nm
外泌体（Exosomes）是细胞分泌到胞外的一种囊泡，大小为 30-150 nm，携带了各种核酸、蛋白质和脂类等物质，可以在不同细胞间进行传递和交流，从而影响受体细胞的生物学功能。 肿瘤细胞来源的外泌体不仅能帮助肿瘤细胞自身发生侵袭和转移，也能促进肿瘤微环境其他细胞的状态发生改变。外泌体在肿瘤中起的作用若要深入研究，这就需要我们拿到更多的肿瘤来源的外泌体。 目前肿瘤方向的研究多使用肿瘤细胞的培养上清来提取外泌体，但是现在我们可以直接利用肿瘤组织来提取外泌体，一方面减少了大量体外
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