- ￥2200
- Frdbio
- MAC0010S
- 武汉
- 2026年06月04日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
9个月
- 供应商：
Frdbio
- 保存条件：
2-8
- 规格：
1000ml
杂交瘤细胞无血清培养液
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产品编号 |
产品名称 |
规格 |
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MAC0010S |
杂交瘤细胞无血清培养液 |
1000ml |
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100X ITSplus |
10ml |
1.产品简介：
杂交瘤细胞无血清培养液是一种无血清悬浮培养基。化学成分明确，无蛋白，无动物源成分。使用本产品可简化后期蛋白纯化的环节，大幅度提高抗体表达效率，并完全避免了单抗制备过程中来源于血清或其他动物源成分的污染风险。
2.保存方法：
2-8℃保存，9个月
4.特征：
1）无蛋白,无动物源成分,简化后期纯化环节;
2）抗体表达效率高;
3）操作简单,无需繁琐的产腹水过程.
5.使用方法：
杂交瘤细胞从含血清培养到无血清培养过程可采用梯度降血清法进行，驯化过程一般建议静置培养，因为对于贴壁细胞来说，生长过程中摇动对其损伤较大。建议在24孔板内驯化，节约培养基。
1) 在24孔细胞培养板里，用原来含血清培养基将细胞培养至60%-70%覆盖板底，平行培养6孔；
2) 吸干板孔内原培养基，平行培养的6个孔内依次加入含梯度血清的无血清培养基（含1% 100X ITSplus 因子)重悬，血清梯度依次为10%-5%-2.5%-1.25%-0.5%-0%），每孔1.5ml培养基。
3) CO2培养箱静置培养24小时，观察细胞状，找到杂交瘤细胞生长最低血清浓度耐受点。
4)在该血清浓度下适应性培养1-2天；
5) 再以该血清浓度耐受点为起始，重复步骤2，步骤3，直到细胞完全适用无血清培养基。
6) 细胞完全适用无血清培养基时，此时细胞处于悬浮或者半悬浮状态；在无血清培养基中扩大细胞培养；
7) 根据实际生产体积需要，按照105/ml的量准备细胞，当细胞数量达标后，离心置换为新鲜无血清培养基，调整细胞密度为105/ml，CO2培养箱摇床培养，135rpm；
8) 细胞数量翻倍后，可以补充相同体积的新鲜无血清培养基继续培养。
9) 细胞培养至80%以上死亡，可以收集培养液，离心取上清，用于纯化抗体。
6.注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
*本试剂仅供实验室研究使用
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文献和实验孔板，100μl/孔 ↓ 放入37。c CO2孵箱培养 （2）制备免疫脾细胞 最后一次加强免疫3天后小鼠拉颈处死 ↓ 无菌取脾脏，培养液洗 一次 ↓ 脾脏研碎，过不锈钢筛网 ↓ 离心，细胞用培养液洗2次 ↓ 计数 ↓ 取108脾淋巴细胞悬液备用 （3）制备骨髓瘤细胞 取对数生长骨髓瘤细胞离心 ↓ 用无血清培养液洗2次 ↓ 计数，取得×107细胞备用 （4）融合 ①将骨髓瘤细胞与脾细胞按1：10
浓度很高。可见该法操作简便、经济，不过，腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白（包括Ig），因此在很多情况下要提纯后才能使用，而且还有污染动物病毒的危险，故而最好用SPF级小鼠。（1）材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液体石蜡。c. 处于对数生长期的杂交瘤细胞。（2）方法：a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后，每天观察小鼠腹水产生情况，如腹部
olivial 最近想用western blot检测小胶质细胞活化后细胞内p-Akt表达情况（包括时间点），那么提蛋白时可否用胰酶消化的方法？加药前是否要将完全培养液换成无血清培养液？ ylhuang0502 Q1. 提蛋白时可否的方法？ A1.: 不要用胰酶消化， 贴壁细胞处理后，立刻至于冰上，用PBS洗三次后，直接加lysis buffer裂解提蛋白，lysis buffer的组分可查查文献，或在本版搜一下。
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