裸鼠胫骨肿瘤浸润模型

（一）目的： 建立实验室动物建模的标准操作规程。 （二）适用范围： 本SOP适应于科沿有道实验室动物实验所有工作人员。 （三）主体内容：

人体肿瘤/裸小鼠系统是研究人体肿瘤的一种较为理想的模型系统。移植后的人体肿瘤在裸鼠体内不仅仍保持原有的组织形态及功能、特有的染色体核型、免疫学特点，而且也保持对抗癌药物和电离辐射的原有特性。以往多将肿瘤细胞接种于裸鼠的腋下或背部肩胛区皮下，按这种方式接种生长的肿瘤组织一般有包膜形成，较少发生远处转移，使肿瘤，特别是高转移潜能的肿瘤的生长偏离了其临床生长特性，因此这个模型不适于进行肿瘤的浸润生长和转移特性方面的研究。近年来人们提出了原位移植(orthotopic implan-tation）模型，即将肿瘤细胞移植到与肿瘤原发部位相同的组织或脏器中，使肿瘤的生长微环境更符合实际。将人成骨肉瘤组织植入（组织块法）或体外培养分离的成骨肉瘤细胞注入（细胞悬液法）裸鼠骨髓腔内，即可建立稳定的裸鼠荷人成骨肉瘤原位移植模型。

1.实验动物：

品系：Balb/C-nude小鼠；

性别：不限；

周龄：6-8周；

体重：18-20g。

2. 操作流程：

1）动物适应性饲养7天；

2）麻醉机麻醉裸鼠，取仰卧位固定前肢及左后肢，使后肢屈曲，胫股骨夹角45°，使用1ml针筒刺入胫股骨干关节间隙进入骨髓腔，注射DU145细胞悬液30μL，约5×10^6个细胞，清理胫骨表面后缝合皮肤。

3.实验结果：

1）活体成像；

2）胫骨Micro-CT；

3）6周后，取胫骨，福尔马林固定，石蜡包埋，进行HE染色。