裸鼠卵巢癌原位移植瘤模型

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    (一)目的:

    建立实验室动物建模的标准操作规程。

    (二)适用范围:

    本SOP适应于科沿有道实验室动物实验所有工作人员。

    (三)主体内容:

    人卵巢癌裸鼠移植瘤模型是较为理想的卵巢癌研究载体,在人卵巢癌的病因、发病机制、生物学性状、放射免疫显像诊断、化疗药物的筛选、基因治疗、免疫治疗、抗肿瘤药物的研发等方面都有重要应用。裸鼠先天性胸腺缺失,细胞免疫缺陷,因此异体组织种植于其体内很少发生排斥反应。这就为人肿瘤组织能够稳定地种植于裸鼠体内奠定了生物学基础。采用人卵巢癌切除标本、人卵巢癌肿瘤细胞株,接种于裸鼠皮下、腹腔、卵巢,可建立原代人卵巢癌裸鼠移植瘤模型、人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型、人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型和人卵巢癌裸鼠原位移植瘤模型。

    1.实验动物:

    品系:Balb/C-nude小鼠;

    性别:雌;

    周龄:6-8周;

    体重:18-20g。

    2. 操作流程:

    1)动物适应性饲养7天;

    2)裸鼠以麻醉机麻醉后固定,背部皮肤备皮、消毒,铺洞巾,自背部正中向右旁开1cm、髂嵴上缘行1cm纵切口,剪开皮肤、皮下组织、肌肉,提夹腹膜,剪开,进入腹腔,切口下为右肾下缘,于其下方找到右卵巢,固定,将0.01ml细胞悬液注射于卵巢深部,压迫1min,生物蛋白胶封闭注射孔,以5-0可吸收缝线缝合腹膜,3-0缝线间断缝合皮下组织、皮肤,再次消毒术野,术毕。

    图片

    3.实验结果:

    建模后第6周,脱颈处死小鼠。对模型鼠进行仔细解剖,记录瘤体径线、重量、形态,计算瘤体体积;记录腹腔积液量、腹腔积液性状;记录盆腔、腹腔、胸腔各脏器浸润转移情况、淋巴结受累情况。各组织取材后迅速以10%中性福尔马林固定,脱水后制作石蜡切片,HE染色作病理学检查。

    图片

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