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- 2026年04月14日
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一、技术简介：
彗星实验（Comet assay）也被称为单细胞凝胶电泳实验（Single cell gel electrophoresis，SCGE），是一种在单细胞水平上检测DNA损伤的技术。当各种内源性和外源性 DNA 损伤因子诱发细胞 DNA 链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA 以及其他成分均扩散到电解液中，而核DNA由于分子量太大不能进入凝胶而留在原位。电泳过程中，如果DNA没有损伤，则将停留在原位，染色后呈圆形的荧光团，无拖尾出现。如果DNA受损，断裂的碎片进入到凝胶中，在电场的作用下，DNA碎片离开原位向阳极迁移，形成拖尾。DNA受损越严重，断裂越多，产生的碎片就越多、越小，则向阳极迁移的DNA碎片量就越多，迁移距离也越长，荧光染色后就能看见“彗星”样尾长并且荧光强度增强。二、实验流程：
收集细胞-铺胶-裂解-解旋-电泳-染色-观察结果。三、实验步骤：
1. 制备单细胞悬浮液，在 37℃ 条件下，悬浮液与低熔点琼脂糖（LM琼脂糖）混合； 2. 将琼脂糖、细胞混合物涂布在预处理的载玻片上； 3. 4℃条件下用裂解液处理30-60min或过夜，裂解液由去垢剂及高盐溶液组成，可去除多余的细胞膜及组蛋白； 4. 将载玻片浸入电泳溶液中； 5. 进行凝胶电泳，随后，中和载玻片，待LM琼脂糖完全干燥后，用荧光染料染色，并于荧光显微镜下观察DNA损伤程度。注：最常用的荧光染料是SYBR Gold，但荧光染料的观察需要荧光显微镜。如果选择银染，使用标准的光学显微镜观察即可。
四、实验结果参考：
五、送样运输要求：
提供至少5*10^5细胞量，4度运输。风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验单细胞凝胶电泳(又名彗星实验)的操作流程主要包括单细胞悬液的制备、凝胶板制备、细胞裂解与解旋、电泳与中和、染色和观察等步骤。本文总结了单细胞凝胶电泳操作步骤和注意事项，希望对初入实验的同学有帮助。 一、分离制备单细胞悬液： 1. 体外培养的细胞株：用胰酶消化，最后用PBS悬浮吹打成单细胞悬液，细胞要计数，具体的量我前边已经说过。 2. 体内脏器细胞：处死动物，取出脏器，于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。 二、胶板制备
死亡，（我觉得应该死亡了，是不是？）但是我想觉得它当时的染色体应该是完整没有破坏的，那有没有实验来证实？ 藤崽 这两天我查了一下，彗星实验-单细胞凝胶电泳是否可以解决这个问题呢？ dnazyme http://www.chemdrug.com/databases/7_3_jborbthasxkcgjjo.html 这个是否对你有启发？ http://www.bioon.com/master/talent/343241
颠覆认知！为了生存，癌细胞竟主动断裂 DNA，Science 研究揭开背后机制
引起 DNA 发生片段化的一种双链特异性核酸内切酶。研究团队发现，癌细胞在辐射后大约 12 到 18 小时出现 DNA 断裂，而 CAD 会在辐射导致的外源性 DNA 损伤后促进一波内源性 DNA 断裂。 为了验证这一点，研究人员辐照人类野生型和 CAD 敲除结直肠癌 HCT116 细胞，并通过彗星实验（单细胞凝胶电泳）和原位缺口翻译法来量化 DNA 断裂程度。结果发现相对于 CAD 敲除细胞，野生型细胞中检测到 DNA 损伤的明显累积，在 IR 后 24 小时明显出现，而且 DNA 断裂的程度取决
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