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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
56
- 英文名:
CDD0102 (CDD0102A)
- CAS号:
146422-58-4
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
Store at -20°C
- 规格:
1mg 5mg 10mg 20mg
| 产品名称 | CDD0102 (CDD0102A) | 产品货号 | CS-01Y75958 |
| 规格 | 1mg 5mg 10mg 20mg | CAS号 | 146422-58-4 |
| 含量 | >98.00% | 分子式 | C8H12N4O |
| 分子量 | 180.21 | 用途 | 仅供科研研究使用 |
CDD0102 (CDD0102A)规格:1mg 5mg 10mg 20mg
CAS:146422-58-4
别名:N/A
化学名:N/A
分子式:C8H12N4O
分子量:180.21
溶解度:Soluble in DMSO
储存条件:Store at -20°C
General tips:For obtaining a higher solubility , please warm the tube at 37 ℃ and shake it in the ultrasonic bath for a while.
Shipping Condition: Evaluation sample solution : ship with blue ice All other available size: ship with RT , or blue ice upon request
产品描述:
CDD0102 is a potent M1 Muscarinic receptor agonist.CDD0102 (CDD-0102) is an efficacious muscarinic agonist in cell lines expressing M1 receptors. CDD0102 displays much lower activity at M3 and M5 receptors[1].After i.p. injections, CDD0102 (CDD-0102) crosses the blood-brain barrier (BBB) in a dose-dependent manner. In toxicological studies, the LD50 of CDD0102 is 190 mg/kg following i.p. injections and greater than 1,000 mg/kg following oral administration. In follow-up studies, after oral administration at a dose of 10 mg/kg, CDD0102 fully reverses memory deficits associated with IgG-192 saporin administration. Again, no side effects are orved at this dose[1].
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
公司正在出售的产品:
| Boc-His(3-Bom)-OMe . HCl | S-8510 phosphate (SB-737552 phosphate) |
| S961 acetate | 胞质动力蛋白检测试剂盒 CD ELISA Kit |
| S961 TFA | 胞浆型磷脂酶A2-α检测试剂盒 cPLA2-α ELISA Kit |
| SA 47 | 伴侣蛋白10检测试剂盒 CPN10 ELISA Kit |
| SA 57 | 胞浆免疫球蛋白检测试剂盒 CIg ELISA Kit |
| SA72 | 半乳糖检测试剂盒 Galactose ELISA Kit |
| Saccharin | 半胱氨酰白三烯检测试剂盒 CysLTs ELISA Kit |
| Saccharin 1-methylimidazole (SMI) | NON ELISA Kit |
| Saccharin sodium hydrate | 本周蛋白检测试剂盒 BJP ELISA Kit |
| Saccharocarcin B | 苯诺龙/苯去甲睾酮检测试剂盒 NP ELISA Kit |
| sacetylcefotaxime (potassium salt) | 鼻检测试剂盒 IgA ELISA Kit |
| S-Acetyl-L-glutathione | 鼻咽癌检测试剂盒 NPC ELISA Kit |
| Saclofen | CDD0102 (CDD0102A)吡哆醛/吡哆醇维生素B6激酶检测试剂盒 PDXK ELISA Kit |
| SR 1664 | 吡哆醛/吡哆醇维生素B6磷酸酶检测试剂盒 PDXP ELISA Kit |
| 臂板蛋白4C检测试剂盒 Sema 4C ELISA Kit | 臂板蛋白3A检测试剂盒 Sema 3A ELISA Kit |
蛋白酶抑制剂混合物实验步骤:
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::yi戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的yi戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::yi戊醇(25:24:1)抽提两次,:yi戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验The Collaborative Drug Discovery (CDD) Database
The broad goals of Collaborative Drug Discovery (CDD) are to enable a collaborative “cloud-based” tool to be used to bring together neglected disease researchers and other researchers from usually separate areas, to collaborate and to share
CDD | 北大张宏权 / 于宇 / 祁丽花课题组揭示整合素相互作用蛋白 Kindlin-2 引发肥厚性心肌病的分子机制
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比对工具,也用到RPS-Blast , BLASTP, 和PHI-BLAST等工具,并且也用到了conserved domain database (CDD) 和PROSITE protein-motif database来保证COBALT 比对结果的质量。关于在线COBALT的用法看另一篇文章” COBALT:NCBI在线蛋白多序列比对(比ClustalW还强大的工具) ”。 这里再讲解如何构建本地的COBALT多序列
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