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- 2026年09月09日
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上海经科化学科技有限公司
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5µg
H2BC3 基因 CRISPR‑Cas9 敲除全套科研解决方案
概述
H2BC3（亦名 H2BFF），别名包括H2B/f，属于组蛋白家族，参与核小体结构形成与染色质重塑，在基因转录调控、细胞周期等表观生物学过程中发挥重要作用，是表观遗传调控领域的重要研究靶点。本套产品构建完整的从基因编辑工具→病毒递送→敲除细胞模型→预制备实验样本全链条方案，覆盖实验不同阶段需求，适配不同实验策略，助力高效开展 H2BC3 基因功能研究，规避自行构建模型周期长、sgRNA 筛选耗时长、敲除效率不稳定等痛点。
整套包含五大类产品：基因敲除质粒、基因敲除慢病毒、敲除 HEK293T 细胞、敲除 HEK293T 细胞 RIPA 裂解液、敲除 HEK293T 细胞 Trizol 裂解液，可单独选购，也可组合配套使用。
各产品核心介绍
1. H2BC3 基因敲除质粒
- 载体特性：慢病毒骨架 CRISPR‑Cas9 敲除质粒，单载体同时表达 Cas9 核酸酶、靶向 sgRNA 与嘌呤霉素筛选标记；细菌扩增为氨苄抗性，可直接转染细胞做基因敲除，也可用于包装慢病毒完成基因编辑操作。套装包含 3 条独立 sgRNA 质粒，多靶点设计提升敲除成功率，降低单 sgRNA 失效风险。
- 适用场景：① 细胞转染直接构建敲除细胞；② 体外包装慢病毒；③ sgRNA 靶点有效性预实验；④ 质粒扩增、分子鉴定。
- 规格：2 μg / 条，共 3 条；‑20℃储存，有效期≥2 年。
提示：实验建议搭配无靶向对照质粒同步开展平行对照实验。
2. H2BC3 基因敲除慢病毒
- 产品特性：基于上述质粒包装获得的复制缺陷型慢病毒，携带 Cas9、靶向 sgRNA 及嘌呤霉素抗性，病毒滴度高，可感染分裂与非分裂细胞；绕过质粒转染效率短板，对于难转染细胞系优势突出。
- 适用场景：各类细胞系、部分原代细胞的 H2BC3 基因敲除；用于构建稳定敲除细胞株；可按需浓缩提高滴度。
- 规格：3 mL，滴度＞3×10⁷ TU。
3. H2BC3 基因敲除 HEK293T 细胞
- 产品特性：已经 CRISPR‑Cas9 编辑完成的 HEK293T 敲除细胞，经过分子水平验证，可直接复苏培养使用，省去质粒构建、病毒包装、感染、药物筛选、单克隆鉴定整套繁琐流程，大幅压缩建模周期。
- 适用场景：H2BC3 基因功能验证；蛋白功能、细胞表型、下游信号通路研究；可作为母本细胞，开展后续回补、过表达等 rescue 实验。
- 规格：1 支 / 瓶。
4. H2BC3 基因敲除 HEK293T 细胞 RIPA 裂解液
- 产品特性：敲除细胞直接制备的蛋白裂解样本，RIPA 体系完整提取总蛋白，样本经过质控。
- 适用场景：Western Blot 蛋白表达验证、免疫共沉淀等蛋白层面实验；快速对比敲除组与对照组蛋白水平差异，无需自行培养、裂解细胞。
- 规格：100 μg。
5. H2BC3 基因敲除 HEK293T 细胞 Trizol 裂解液
- 产品特性：敲除细胞制备的 Trizol 裂解样本，可直接提取总 RNA。
- 适用场景：qPCR、转录组测序等 RNA 水平研究；快速检测敲除后基因转录本变化。
- 规格：100 μL。
灵活实验方案推荐
方案 A：自主构建模型（适合希望在多种细胞上做敲除）
敲除质粒 →（可选包装慢病毒）→ 转染 / 感染目标细胞 → 嘌呤霉素筛选 → T7EI / 测序验证敲除效率 → 筛选多克隆 / 单克隆细胞株。
方案 B：难转染细胞体系
敲除慢病毒 → 感染靶细胞 → 药物筛选 → 鉴定获得敲除细胞。
方案 C：快速预实验、初筛表型（快速拿到敲除样本数据）
直接选用敲除 HEK293T 细胞 + RIPA 裂解液 + Trizol 裂解液，立刻开展蛋白、转录水平初筛，快速获得初步实验结果，再决定是否自建其他细胞模型。
产品核心优势
- 一站式闭环：从编辑工具、病毒、活细胞到预制蛋白 / RNA 裂解样本，全链路配套，无需多方采购，实验体系一致性好。
- 降低实验门槛：3 条 sgRNA 组合提高敲除成功率；预制敲除细胞、预制裂解样本大幅缩短实验周期，节省 sgRNA 验证、细胞筛选时间人力。
- 多重验证维度：支持基因组水平、蛋白水平、转录水平多层次验证 H2BC3 敲除效果。
- 灵活选配：5 类产品支持单独采购，也可组合成套，适配不同预算、不同实验目的。
- 科研限定用途：全部试剂仅限科研实验使用，不用于临床诊断、治疗。
研究应用方向
✅ H2BC3 基因功能机制研究 ✅ 基因敲除细胞表型分析 ✅ 下游信号通路与互作分子筛选 ✅ 蛋白表达与转录水平验证 ✅ 基因回补、功能 rescue 实验模型
储存说明
敲除质粒、慢病毒、RIPA 裂解液、Trizol 裂解液建议‑20℃保存；敲除细胞按照细胞培养常规条件冻存，避免反复冻融。
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文献和实验Hu, R.; Qin, J.; Feng, W.; Song, X.; Huang, H.; Dai, C.; Zhang, B.; Chen, Y. Lysosomal zinc nanomodulation blocks macrophage pyroptosis for counteracting atherosclerosis progression. Sci. Adv. 2025, 11, eadu5315
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
前期记录先确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因然后对目的基因进行背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- 目标基因背景调查设计 sgRNA 及引物CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计好之后对前期文章的补充：设计 sgRNA 之后，需要对结果进行判断：但为什么 0.7044 分数的哪一个没有选，我也不知道为什么，总感觉他们的顺序不是随意的排的。或许有人能解答一下为什么。顺手把设计工具的解说放上
最近 CRISPR/Cas9 基因敲除技术可谓风靡全世界的实验室，CRISPR 被称为规律成簇间隔短回文重复，其实际上就是一种基因编辑器，是细菌用以保护自身对抗病毒的一个系统。后来，研究人员发现，它似乎是一种精确的万能基因武器，可以用来删除、添加、激活或抑制其他生物体的目标基因。由于其相对于前几代基因敲除技术而言更为简便高效。所以一经问世便受到科研界的热捧。利用 Cas9 质粒建立 knock-out 细胞系实验过程主要有以下几步：1. 确定待敲除基因的靶位点；2. 设计识别靶位点识别的一对
和RecBCD蛋白组成，在基因敲除时必须以环状质粒存在）、结合转化敲除系统及温度敏感型质粒敲除系统等可供选择。 2 FLP-FRT系统和Cre-loxP系统 这两个系统都是位点特异性重组酶系统，其中FLP-FRT源于酿酒酵母，Cre-loxP源于F1噬菌体。两个系统的基本原理类似。以Cre-loxP系统为例，该系统含有两种成分：第一个部分是一段长34 bp的重组酶识别的DNA序列（loxP），其中含有两个13 bp的反向重复序列和一个8 bp的核心序列；第二个是Cre
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