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至少一年有效
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pLenti-H2AC12-sgRNA
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- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 规格：
5µg
pLenti-H2AC12-sgRNA (H2AC12基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
H2AC12基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | H2AC12 | 85235 | BC134366 | NM_080596 |
| About the gene | |
| Official Symbol | H2AC12 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | histone cluster 1 H2A family member h |
| Synonyms | H2AFALii; dJ86C11.1; H2A/S |
| Location | 6p22.1 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q96KK5 |
| Pathway/Library | Epigenetic Regulators Related Genes Library |
| Gene Summary | Histones are basic nuclear proteins that are responsible for the nucleosome structure of the chromosomal fiber in eukaryotes. Two molecules of each of the four core histones (H2A, H2B, H3, and H4) form an octamer, around which approximately 146 bp of DNA is wrapped in repeating units, called nucleosomes. The linker histone, H1, interacts with linker DNA between nucleosomes and functions in the compaction of chromatin into higher order structures. This gene is intronless and encodes a replication-dependent histone that is a member of the histone H2A family. Transcripts from this gene lack polyA tails but instead contain a palindromic termination element. This gene is found in the histone microcluster on chromosome 6p21.33. |
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文献和实验Hu, R.; Qin, J.; Feng, W.; Song, X.; Huang, H.; Dai, C.; Zhang, B.; Chen, Y. Lysosomal zinc nanomodulation blocks macrophage pyroptosis for counteracting atherosclerosis progression. Sci. Adv. 2025, 11, eadu5288
上有较大差异，因此同时设计构建 2～3 个靶点的基因敲除载体再从中选出敲减效果较佳的靶点。N1-N20 NGG 靠近 PAM 的碱基对靶点的特异性很重要，前 7～12 个碱基的错配对 Cas9 切割效率影响较小。设计好的靶点序列应在基因库中进行 BLAST 检测。Cas9Nicknase 需要挑选成对的靶点。一般在正义链和反义链上分别挑选相距 20～30bp 的靶点配对。多对靶点的敲除效率常有较大差异。由于基因敲除实验时间长，在正式对目的细胞进行敲除前对靶点进行验证和挑选非常必要。二、 插入
plenti-CMV-EGFP-LC3 质粒 plenti-CMV-mRFP-EGFP-LC3 质粒 2. LC3 细胞自噬病毒 plenti-CMV-EGFP-LC3慢病毒 plenti-CMV-mRFP-EGFP-LC3 慢病毒 plenti-CMV-EGFP-LC3 腺病毒 plenti-CMV-mRFP-EGFP-LC3 腺病毒 文献支持（部分） 1. Autophagy 10:10, 1-13; October 2014 Endoplasmic
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