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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
零下80℃
- 保质期:
至少2年有效
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
200μl
产品简介:
碧云天生产的TOP10甘油菌(TOP10 Glycerol Stock),是收集生长在对数期的TOP10菌,加入含有甘油的细菌冻存液制备而成。本甘油菌可以直接划平板或小量、大量培养。TOP10甘油菌有时也被写作TOP 10甘油菌。
TOP10菌株来源于MC1061菌株,是目前实验室最常用的菌株之一,基因型与DH10B高度类似(DH10B为galE15型,而TOP10为galU型)。TOP10生长速度快(比DH5α快,但比Mach1-T1生长速度慢),涂板后10小时可见菌落克隆,recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。常用于构建克隆,蓝白斑筛选等实验。
TOP10菌株基因型:F- mcrA Δ (mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZ Δ M15 Δ lacX74 recA1 ara Δ 139 Δ (ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG。
本菌株可以使用常规的2YT或LB培养基进行培养。
保存条件:
-20℃保存,至少3个月有效。-80℃可以长期保存。
注意事项:使用本甘油菌时可以不必完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加细菌的活力会逐渐下降。在没有结冻的情况下,菌体会逐渐沉淀至管底,请务必注意适当混匀后使用。
为保证菌种纯正,避免其它细菌污染,尽量先划平板然后再挑单克隆菌落进行后续操作。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验TOP10 chemically competent cells
Overview This protocol is a variant of the Hanahan protocol [1] using CCMB80 buffer for DH10B, TOP10 and MachI strains. It builds on Example 2 of the Bloom05 patent as well. This protocol has been tested on TOP10, MachI and BL21(DE3) cells
xiaomage124 请问丁香园里的战友们,谁做过点突变?TOP10F'是不是甲基化菌株?恳请指教,多谢啦!:)有请好人帮我分析下TOP10F'菌株是否有甲基化功能,因为我要做点突变,如果这个菌株具有甲基化外源质粒DNA的功能就可以了,以下是此菌株对应的基因型,多谢啦!:) F'{lac Iq Tn10(TetR)} mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 △lacⅩ74 recA1 araΔ139Δ(ara
1. 组织解离常用方法 组织解离主要依赖酶解法和机械分离法,或将两者结合以达到最佳效果 (1)酶解法(Enzymatic Digestion) 利用特异性蛋白酶水解构成组织结构的细胞外基质(ECM)和细胞间的连接蛋白,从而将细胞从组织微环境中释放出来。这是目前最主流且高效的解离方法。为防止死亡细胞释放的 DNA 导致细胞聚集,消化液中通常会添加 DNase I。 (2)机械分离法 (Mechanical Dissociation) 通过物理手段,如精细剪切、温和研磨、移液器吹打或自动化仪器震荡
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